[发明专利]一种灰褐链霉菌菌株、及利用该菌株制备ε-聚赖氨酸及其盐的方法

说明书

技术领域

本发明属于发酵工程、食品工程技术领域，具体涉及一种高产聚赖氨酸的微生物菌株灰褐链霉菌，将它用于聚赖氨酸及其盐的生产及具体的生产制备方法。

背景技术

聚赖氨酸是由微生物合成的L-赖氨酸同聚物，由ε-氨基与羧基通过肽键连接而成。ε-聚赖氨酸具有抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌和病毒的活性，是一种性能优良的生物防腐剂。除外，还用作化妆品、基因载体、药物包被物、电子材料和环保材料。

1977年日本酒井平一和岛昭二在大量筛选D.P.阳性物质(生物碱)时发现白色链霉菌发酵液中有大量的D.P.物质，这种物质后来被证明是天然ε-聚赖氨酸(Shojl shima et al.Agric Biol Chem，1977，41(9)：1807～1809)。随后藤井正弘等人在1989年发现Streptomyces noursei也能产生ε-PL(藤井正弘等.公开特许公报[P].JP401187090A)。此后发现了不少能产生ε-PL的菌株，大多集中于链霉菌科。1989年日本Chisso公司利用白色链霉菌实现了产业化生产，几乎垄断了聚赖氨酸的国际市场。

目前，在国内也仅出现利用白色链霉菌生产ε-聚赖氨酸(如专利号2007100672507，200710057098)，利用北地孢菌生产ε-聚赖氨酸(如专利号200510037774)，利用球形节杆菌菌株生产ε-聚赖氨酸(专利号为200910025270)。即相对于国外的垄断生产，在国内ε-聚赖氨酸的生产由于菌株及技术等原因仍然受到许多限制。因此，筛选新的ε-PL生产菌株，了解ε-PL产生菌的生物多样性，开发出高效高产稳定的ε-聚赖氨酸制备方法仍是十分有意义的。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种高产ε-聚赖氨酸的微生物菌株。

本发明的另一个目的是将上述菌株用于ε-聚赖氨酸及其盐的生产，并提供其所制备方法。

上述目的可以通过以下技术方案来实现：

一种灰褐链霉菌菌株，该菌株分类命名为Streptomyces griseofuscusLS-H1，目前该菌株保藏于武汉中国典型培养物保藏中心，其简称为CCTCC，登记入册的编号是CCTCC M 209211，保藏日期是：2009年9月27日。

经鉴定，菌株具有下述性质：

1、形态特征：

菌株在高氏一号培养基上生长较差，在酵母膏蛋白胨培养基上气生菌丝生长良好，孢子丝呈波曲状，孢子成链状排列，在电子显微镜下孢子长椭圆形至椭圆形；菌落及其背面为灰褐色至黑色。

2、培养特征

30℃培养7-10天，观察菌株在下列各种培养基上的特征。

3、生理生化特性：

(1)培养温度：在20-40℃。最适温度为30℃。

(2)明胶液化淀粉水解牛奶胨化：阳性。

(3)牛奶凝固：阳性。

(4)纤维素利用：阴性。

(5)H₂S生成：阴性。

(6)几丁质酶产生：阴性。

(7)色素产生：产黑色素。

4、16SrDNA序列分析：

菌株H1的16srDNA长度1484bp，其序列如下。