[发明专利]大豆和土壤中萘乙酸钠的残留量测定方法

说明书

技术领域：

本发明属于农药残留量的测定技术领域，特别是涉及大豆和土壤中萘乙酸钠的残留量测定方法。

背景技术：

世界卫生组织和联合国粮农组织(WHO/FAO)对农药残留限量的定义为，按照良好的农业生产(GAP)规范，直接或间接使用农药后，在食品和饲料中形成的农药残留物的最大浓度。首先根据农药及其残留物的毒性评价，按照国家颁布的良好农业规范和安全合理使用农药规范，适应本国各种病虫害的防治需要，在严密的技术监督下，在有效防治病虫害的前提下，在取得的一系列残留数据中取有代表性的较高数值。它的直接作用是限制农产品中农药残留量，保障公民身体健康。在世界贸易一体化的今天，农药最高残留限量也成为各贸易国之间重要的技术壁垒。大豆是我国的传统出口物资。在欧盟、日本、韩国等国和地区对转基因产品进行严格限制和管理的情况下，我国非转基因大豆的出口前景十分看好。为了我国大豆能畅通无阻地进入各国市场，了解和研究进口市场对大豆农药残留限量的规定，保证大豆中农药残留控制在进口国允许的范围之内就至为重要。

萘乙酸钠为纯白色晶体，具有萘的气味，可溶于乙甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂，易溶于水。萘乙酸纯品为无色针状晶体，无臭无味，熔点为134.5～135.5℃，易溶于乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯和醋酸等。萘乙酸不溶于冷水，微溶于热水。萘乙酸为广谱性植物生长调节剂，可促进细胞分裂，诱导形成不定根，增加座果，改变雌雄花比率等。萘乙酸主要经由植物叶片、嫩枝表皮、种子进入植物体内，随营养液流输导到起作用的部位。萘乙酸钠本身毒性不是很大，但其在环境水样、水果及蔬菜中的降解行为不甚明了，因此需要建立一种简便，快速有效的分析方法。

发明内容：

本发明通过样品与盐酸反应，将萘乙酸钠转化成萘乙酸，用液相色谱(DAD检测器)检测样品中萘乙酸残留量。具体是使用有机溶剂对大豆和土壤中萘乙酸钠进行提取，然后通过液液分配分离出有机溶剂层，去除提取液中干扰物质，并利用旋转蒸发将萃取液完全浓缩至干，最后采用液相色谱法进行检测。为实现上述目的，本发明提供如下的技术方案：

大豆和土壤中萘乙酸钠残留量的测定方法，其特征在于按如下的步骤进行：

(1)提取：称取样品10-20g，置于具塞锥形瓶中，加入纯水15-40ml和1mol/l盐酸1-5ml，静置20-30分钟，再加50-70ml甲醇或乙腈，振荡提取30-60分钟；

(2)分离：过滤转移至分液漏斗中，加氯化钠饱和水溶液，振荡3分钟，静置10-20分层；

(3)萃取：用30-70ml甲醇或乙腈再次萃取水相，合并甲醇或乙腈经无水硫酸钠干燥后，旋转蒸发将萃取液完全浓缩至干，用甲醇定容并过0.45ul滤膜；

(4)测定：采用液相色谱法检测样品中萘乙酸残留量；其中萘乙酸的最低检出浓度均为0.009mg/kg-0.061mg/kg。

本发明测定萘乙酸钠残留量的具体方法如下：

1、试验材料

仪器设备：Agilent1200液相色谱仪，(配置DAD检测器)，UCHI旋转蒸发器，ZQ-C空气浴振荡器，IKA匀浆机。

试剂：乙腈，浓盐酸，浓磷酸，无水硫酸钠，氯化钠(为分析纯)，甲醇(色谱纯)，纯水。

标准品：萘乙酸(99％)、萘乙酸钠(99％)。

2、样品前处理：

称取样品10.0g，置于具塞锥形瓶中，加入纯水20ml和1mol/l盐酸1ml，静置20分钟，再加50ml乙腈，振荡提取30分钟。过滤转移至分液漏斗中，加氯化钠饱和水相。振荡3分钟，静置分层，分离乙腈相和水相；用50ml乙腈再次萃取水相，合并乙腈层经无水硫酸钠干燥后，浓缩至干，用甲醇定容并过0.45ul滤膜。

3、仪器条件：

流动相：甲醇∶磷酸水溶液(0.1％)＝50∶50(V∶V)

流速：0.5ml/min

色谱柱：XDB-C18，1.8μm，4.6x50mm

柱温：40℃

波长：220nm

进样量：5μl

4、最低检出浓度：

大豆籽粒、植株、土壤中萘乙酸的最低检出浓度均为0.009mg/kg，即萘乙酸钠为0.010mg/kg。

5、添加回收率试验

在大豆籽粒、植株、土壤中分别添加萘乙酸钠标准品，添加浓度为0.01mg/kg和0.1mg/kg，五次重复。回收率结果见表1

表1萘乙酸钠添加回收率试验

本发明的大豆和土壤中萘乙酸钠残留量的测定方法具有操作简单快捷，回收率高，灵敏度高，杂质干扰小的特点。

附图说明：