[发明专利]一种从独活中提取佛手柑内酯的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及佛手柑内酯的提取纯化工艺，特别是一种应用回流提取、硅胶层析、沉淀提取纯化佛手柑内酯的方法。

背景技术：

佛手柑内酯(Bergapten)

别名：香柑内酯，香柠檬内酯，佛手醇甲醚，佛手烯

化学名：4-methoxyfuro[3，2-g]chromen-7-one

分子式：C₁₂H₈O₄

分子量：216.18952

成分分类：呋喃香豆素类

物理性质：佛手柑内酯为为白色带丝光的针状结晶，熔点188-190℃。易溶于氯仿，微溶于苯、醋酸乙酯和乙醇，不溶于水。有升华性。紫外光灯下反射蓝色荧光。

药理作用：佛手柑内酯对皮肤有光学活性，作用仅次于8-甲氧基补骨脂素。有杀灭软体动物作用，主要用于杀灭钉螺。有一定对抗肝素的抗凝血作用和止血作用。对兔有一过性降血压作用。还有抗微生物活性。具有抗炎、镇痛的药理作用。

从独活中单独提取佛手柑内酯的报道几乎为零。一般方法通常是采用色谱法或层析法提取总香豆素，然后用不同的洗脱剂分离其中的某个成分。通常所用的层析法有硅胶层析和氧化铝层析，碱性氧化铝会使一些香豆素变质，所以氧化铝对香豆素类适用性不是很好。水蒸气蒸馏法虽用于香豆素提取，但对易挥发的小分子香豆素有局限性。近年来高效液相色谱也普遍用于分离香豆素成分，不过对酯基少的香豆素类提取效果不是很好。

发明内容：

本发明目的在于报道一种工艺简单，能耗较低，溶剂用量省、残留少、毒性低，纯度极高的佛手柑内酯制法。

本发明的目的是这样来实现的：

①回流提取：将独活粉碎为60～100目，用乙醇回流提取，过滤，得提取液；

②脱色：上述洗脱液中加入活性炭，搅拌脱色1.5～2小时，得脱色液；

③硅胶柱层析：将上述脱色液减泵入预处理过的硅胶中压柱，用9～4∶1的石油醚/乙酸乙酯混合液洗脱，合并佛手柑内酯洗脱液；

④结晶：上述洗脱液减压浓缩后用适量甲醇在40～50℃热溶，静置析出佛手柑内酯，滤出佛手柑内酯，重复2～4次，阴干，即得。

上述提取佛手柑内酯的方法，其特征在于所述回流提取步骤乙醇浓度为70～80％，用量是原料重量的10～20倍，提取时间是3～5小时。

上述提取佛手柑内酯的方法，其特征在于所述脱色步骤条件为恒温40～50℃，活性炭用量为原料质量的0.5～1％。

上述提取佛手柑内酯的方法，其特征在于所述硅胶洗脱步骤洗脱速度为60ml/min，每500ml收集一次洗脱液，用TLC识别各组组分，合并得到佛山柑内酯洗脱液。

上述提取佛手柑内酯的方法，其特征在于所述结晶步骤甲醇为70～80％甲醇，每次用量为柱体积的2～3倍量。

本发明存在以下优点：硅胶层析是比较成熟的分离香豆素类物质的方法，既节省能耗，又能很好地分离结构相似的香豆素类，特别是对呋喃香豆素类；采用中压快速柱层析技术，分离效果好，生产周期短，且能实现连续生产硅胶可反复使用2～6个月以上，因此用量极少，省去劳动强度大的拌硅胶及装柱工序，提高了工效；由于佛手柑内酯在原料中含量很低，硅胶分离后含量还是不够高，因此甲醇反复结晶能进一步提高含量，结晶用冷却的方式使产物析出，避免了浓缩挥发可能导致的损失。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将独活粉碎为60目，取10kg(佛手柑内酯含量0.0046％)加入100L70％乙醇回流提取3小时，过滤得104L提取液，加50g活性炭恒温40℃搅拌脱色，脱色液泵入预处理过的硅胶中压柱，用9∶1的石油醚/乙酸乙酯混合液保持流速60ml/min洗脱，按每份500ml收集洗脱液，TLC识别各组成分，合并含佛手柑内酯段洗脱液，洗脱液用10L70％甲醇在40℃热溶，静置，滤出结晶，重复结晶2次，阴干得针晶成品2.95g(佛手柑内酯含量98.4％)。

实施例2：