[发明专利]一种高效制备鲁斯可单糖苷的方法无效
申请号: | 200910233989.X | 申请日: | 2009-10-22 |
公开(公告)号: | CN101693913A | 公开(公告)日: | 2010-04-14 |
发明(设计)人: | 余伯阳;张剑;朱丹妮;陈乃东;程启厚 | 申请(专利权)人: | 南京启维医药科技有限公司;余伯阳;张剑 |
主分类号: | C12P33/20 | 分类号: | C12P33/20;C12R1/645 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人: | 牛莉莉 |
地址: | 211101 江苏省南京市江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 制备 鲁斯可单 糖苷 方法 | ||
1.一种高效制备鲁斯可单糖苷的方法,其用保藏号为NRRL1086的菌株对鲁斯可皂苷元进行生物转化而获得鲁斯可单糖苷,所述生物转化的步骤依次包括:
a、配制液体培养基;
b、将NRRL1086菌株接种至液体培养基,在摇床中培养10~48小时得到种子液;
c、将种子液发转接至液体培养基继续培养,得到发酵液;
d、往发酵液中加入溶有鲁斯可丙酮溶液和碳源,并共培养4~7天,所述碳源为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉中一种或几种;
e、发酵液用有机溶剂A萃取3~6次,所述有机溶剂A为乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲酸乙酯、乙酸丁酯、甲苯、己烷、正丁醇中的一种;
f、浓缩萃取液,得浸膏,通过硅胶柱层析分离,得到目标化合物——鲁斯可单糖苷。
2.根据权利要求1所述的高效制备鲁斯可单糖苷的方法,其特征是所述液体培养基含10%~30%的马铃薯煎煮液、KH2PO4、MgSO4、维生素B1、NaCl、KNO3和FeSO4;
3.根据权利要求2所述的高效制备鲁斯可单糖苷的方法,其特征是所述液体培养基中,以1000毫升马铃薯煎煮液计,含0.1~10克KH2PO4、0.1~5克MgSO4、0.01~1克维生素B1、0.1~10克NaCl、0.1~10克KNO3、0.1~7克FeSO4。
4.根据权利要求3所述的高效制备鲁斯可单糖苷的方法,其特征是所述液体培养基中,按20%马铃薯煎煮液1000毫升计,KH2PO40.1~0.5克;MgSO4 0.05~0.5克;NaCl 0.5~0.8g、KNO3 2.0~4.0g、FeSO4 0.005~0.03g;碳源0.5~2.5克。
5.根据权利要求4所述的高效制备鲁斯可单糖苷的方法,其特征是所述液体培养基的pH=5.0~7.0。
6.根据权利要求5所述的高效制备鲁斯可单糖苷的方法,其特征是菌种在培养前先进行活化,活化时间20~30h。
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