[发明专利]新生儿溶血病检测试剂盒的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种用于血型鉴定血型血清学检测试剂盒及其应用。更具 体的说，本发明涉及一种新生儿溶血病检测试剂盒的组成、制备方法及其 应用，涉及输血医学领域。

(二)背景技术

新生儿溶血病(简称HDN)是指母婴血型不合，胎儿和新生儿的红细 胞被母亲的IgG血型抗体包被，并在婴儿的网状内皮系统内受到破坏的免 疫性溶血性疾病。

本病的病因是母婴血型不合。胎儿的血型基因一半来自母亲，另一半 来自父亲，当胎儿由父体遗传获得的显性抗原恰为母体缺乏时，此抗原在 妊娠时通过胎盘进入母体，刺激母体产生相应的免疫抗体，此抗体可因再 次怀孕得到刺激而加强。这种抗体的性质为免疫性抗体，并且能够通过胎 盘。一旦这种抗体通过胎盘进入胎儿血循环，就可能与胎儿红细胞上相应 抗原结合，导致红细胞发生溶血现象，引起死胎、流产或早产。出生后表 现为贫血、黄疸，严重会导致心力衰竭及核黄疸。

理论上，凡是以IgG性质出现的血型抗体都可以引起新生儿溶血病， 但主要发生在ABO及Rh系统，其中Rh系统的新生儿溶血病病情较严重。 其它血型系统不合溶血病如Kidd、MN、Duffy等也有报道，但极少见。抗 P1、抗Lea、Leb等属IgM性质，不能通过胎盘，故不会产生HDN。

(1)ABO新生儿溶血病

ABO血型不合新生儿溶血病是由于母婴ABO血型不合，母体的IgG 抗A或抗B经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞引起HDN。由于自 然界中广泛存在着A型和B型物质，如寄生虫感染、预防接种等都可以使 孕妇产生免疫性抗A及抗B抗体，即孕妇体内可以在妊娠前已存在免疫性 抗体，所以ABO系统新生儿溶血病可以在第一胎就发病。从理论上讲，母 /子血型为O/A、O/B、A/B、B/A等组合都有可能使婴儿发生HDN，但实 际上90％以上的HDN患儿母亲为O型，这与O型母亲含有丰富的IgG抗 A(B)抗体有关。A(B)型母亲所生B、AB型(A、AB)新生儿仅少数 发生溶血病。IgG抗A(B)抗体效价与溶血程度有一定相关性，但并非绝 对，这可能与新生儿A、B抗原强弱、型物质的含量、胎盘的屏障作用及 IgG亚类不同等有关，ABO HDN一般不易作到产前准确预报。

但由于ABO HDN的发病程度与母体内IgG抗A、抗B的效价有一定 相关性。因此，可以定期检测孕妇体内IgG抗A(B)的效价来判断胎儿 的受害情况，如果母体内IgG抗A(B)效价随着孕期增加而增长，提示 胎儿受害的可能性增大。患儿出生后第二天出现黄疸，5天达高峰，一般 有贫血，肝脾肿大等症状，严重者可引起核黄疸，智力低下或胎儿水肿。

(2)Rh新生儿溶血病

Rh HDN是由于母婴Rh血型不合所致的Rh免疫抗体作用于胎儿红 细胞造成的高胆红素血症。Rh血型抗体只能由人类红细胞作为抗原刺激 引起同族免疫作用而产生，Rh HDN一般可作到产前预报。

大部分Rh HDN发生在母亲是Rh阴性的情况，抗体种类有抗D、抗 cD、抗DE、抗CD、抗CDE等，汉族人中大约60％与抗D有关。

由于新生儿溶血病是新生儿期的常见病之一，因此，对新生儿溶血 病作产前预报、产后早期诊断以便及时采取防治措施是很重要的。要做 到产前预报和产后早期诊断就必须对孕妇作正确的免疫学分析及血型血 清学检查。

目前国内外HDN的免疫学分析及血型血清学检查项目：

(1)产前预测

1、夫妇双方的ABO血型，以及Rh(D)血型

2、女血清灭活IgM抗体后，与男红细胞的反应。

3、女血清灭活IgM抗体后，与O型筛选红细胞的反应。

4、女血清灭活IgM抗体后如果存在有意义的IgG抗体，则需要检 测此抗体效价。

(2)产后检测

1、母和子的ABO血型，母Rh(D)血型

2、子红细胞直接抗人球蛋白试验

3、子血清中游离抗体检测

4、子红细胞放散液检测

5、母血清灭活IgM抗体后，针对子红细胞上抗原的IgG抗体效价2～ 4项中如果有一项为阳性，则诊断为新生儿溶血病。