[发明专利]一种碳酸钙结合蛋白及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种碳酸钙结合蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

珍珠不仅是一种美丽的装饰品，还具有重要的医用、药用价值。在我国古代医书记载中，使用珍珠粉的中药就有20余种，如六神丸、镇惊丸、珍珠散、珠黄散等等；现代医学科学分析更进一步显示，珍珠粉中含有人体中必不可少的多种氨基酸和微量元素，能增强人体细胞ATP酶的活力和调节血液酸碱度。近年来的研究发现，珍珠层还具有良好的生物兼容性以及促进成骨的活性，是一种理想的骨替代材料。鉴于珍珠的应用如此广泛，需要建立高效合成珍珠的方法，以供市场之需。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种用于珍珠合成的蛋白及其编码基因。

本发明所提供的蛋白，名称为ACCBP，是如下a)或b)的蛋白质：

a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

b)由序列表中序列2所示的氨基酸序列自N端起第25-240位氨基酸残基组成的蛋白质；

c)将a)或b)所述的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由a)或b)衍生的蛋白质。

为了使a)、b)或c)中的蛋白便于纯化，可在所述蛋白的N端或C端连接上如表1所示的标签。

表1.标签的序列

  标签  残基  序列  Poly-Arg  5-6(通常为5个)  RRRRR  Poly-His  2-10(通常为6个)  HHHHHH  FLAG  8  DYKDDDDK  Strep-tagII  8  WSHPQFEK  c-myc  10  EQKLISEEDL

上述a)、b)或c)中的蛋白可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述(b)中的蛋白的编码基因可通过将序列表中序列1所示的DNA序列缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。

本发明所提供的编码基因具体可为如下1)、2)、3)或4)所示的基因：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1所示DNA分子；

2)其核苷酸序列是序列表中序列1自5′末端起第73-723位核苷酸所示DNA分子；

3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子；

4)与1)或2)限定的DNA序列具有90％以上的同源性且编码所述蛋白的DNA分子。

上述严格条件可为在6×SSC，0.5％SDS的溶液中，在50℃以上、65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。