[发明专利]中药黄芪原植物的分子鉴别方法无效
申请号: | 200910236476.4 | 申请日: | 2009-10-29 |
公开(公告)号: | CN102051409A | 公开(公告)日: | 2011-05-11 |
发明(设计)人: | 黄璐琦;钱丹;陈敏;崔光红;袁庆军 | 申请(专利权)人: | 中国中医科学院中药研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100700 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中药 黄芪 植物 分子 鉴别方法 | ||
1.一种黄芪原植物的鉴别方法,其特征在于该鉴别方法采用测序及单倍型的方法,该方法包括下列步骤:
黄芪原植物的总DNA的提取;
叶绿体引物的筛选及测序条件的优化;
PCR扩增;
PCR产物测序;
测序结果分析及判定。
2.根据权利要求1所述的一种黄芪原植物的鉴别方法,其特征在于黄芪原植物的总DNA可以从干的或新鲜黄芪原植物材料中提取。
3.根据权利要求2所述的一种黄芪原植物的鉴别方法,其特征在于黄芪材料可以是黄芪的任一部分或黄芪粉末。
4.根据权利1所述的一种黄芪原植物的鉴别方法,其特征在于筛选的PCR扩增的引物,筛选在黄芪原植物的叶绿体trnH-psbA序列,其序列为:
trnH:5’-CGCGCATGGTGGATTCACAATCC-3’
psbA:5’-GTTATGCATGAACGTAATGCTC-3’
5.用权利要求4所述的引物进行PCR反应,PCR反应参数为94℃预变性4min;进行30次循环(94℃45s,58℃30s,72℃90s),后延伸72℃7min,获得扩增产物。
6.根据权利要求5所述的方法扩增后,PCR扩增产物直接测序。
7.根据权利要求1所述的一种黄芪原植物的鉴别方法,其特征在于叶绿体trnH-psbA序列的单倍型分析及判定可以采用软件进行分析,也可以人工统计。
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