[发明专利]以病毒mRNA核转运为靶点的抗HIV-1药物筛选方法无效
申请号: | 200910237159.4 | 申请日: | 2009-11-09 |
公开(公告)号: | CN102051378A | 公开(公告)日: | 2011-05-11 |
发明(设计)人: | 岑山;刘振龙;李晓宇;张全;魏晓露;贾平平;杨亮 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02;G01N21/64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒 mrna 转运 hiv 药物 筛选 方法 | ||
1.一种真核表达载体,其具有报告基因,在所述报告基因的上游和下游分别具有SD序列的UTR片段和RRE片段。
2.如权利要求1所述的表达载体,其特征在于,所述报告基因为荧光蛋白。
3.如权利要求2所述的表达载体,其特征碍于,所述荧光蛋白为GFP、RFP、YFP。
4.如权利要求1或2所述的表达载体,其特征在于所述报告基因基因的密码子为HIV-1病毒偏爱性的密码子。
5.如权利要求1所述的所述的表达载体,其特征在于该表达载体为pUTR-hivGFP-RRE。
6.权利要求1~5任一项所述表达载体与表达Rev的表达载体共转染的细胞。
7.一种筛选抗HIV-1药物的方法,其特征在于,将权利要求1~5任一项所述的表达载体与表达Rev的表达载体共转染宿主细胞,添加待检样品至共转染后的宿主细胞,检测细胞中报告基因编码产物的表达量,判断样品是否对Rev蛋白具有抑制作用。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,在检测时还包括以LMB作为阳性药物对照。
9.如权利要求7或8所述的方法,其特征在于,所述表达Rev的表达载体为pCDNA3-Rev。
10.如权利要求7或8所述的方法,其特征在于,所述宿主细胞为293T细胞。
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