[发明专利]一种鸡法氏囊抗体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫学领域，具体地，本发明涉及一种鸡法氏囊抗体的制备方法。

背景技术

卵黄抗体是指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，由于卵黄中仅有IgG 类抗体，故称其为卵黄免疫球蛋白IgG(egg yolkimmunoglobulins)，简称为IgY。卵 黄抗体的研究始于19世纪末，1893年Klemperer发现了卵黄中富含抗体；1934年 Jukes的实验证明母鸡血清中的抗体可以转移到卵黄中，从而为雏鸡提供被动免疫保 护。Patters等的试验证实，相对别的血浆蛋白，IgG被选择性的转运到卵泡中。1969 年，Leslie和Clem将这种抗体命名为IgY。

卵黄抗体的形成过程是：当机体受到外界特异性抗原(尤其是灭活抗原)的刺 激后诱发一系列的免疫应答反应，激发B细胞分化成能分泌特异性抗体的浆细胞， 分泌大量的特异性抗体进入血液中。同时在产蛋禽体内，血液中的特异性抗体IgG (所有亚群)由卵巢IgG受体的介导逐步进入到卵巢滤泡和输卵管中，并在卵黄中 蓄积起来，也正是由于这种卵黄累积作用，使卵黄中的IgG明显地高于血清中的含 量，而血清中的其他抗体(主要是IgM，IgA)与输卵管中的卵白白蛋白一起混入到 鸡蛋白中。

卵黄抗体在多种环境中有较高的稳定性，在低于75℃条件下，卵黄抗体具有良 好的热稳定性，90℃处理15min后，大部分卵黄抗体丧失结合活性，在pH＜4时， 仅有少量卵黄抗体失去活性。在pH4-12范围内，卵黄抗体的活性几乎不受影响，在 pH＞12时，卵黄抗体迅速失去结合活性。实验表明，卵黄抗体具有耐受反复冻融的 特性，即使经过5次冻融，其抗原结合活性几乎不受影响。在室温下可保存6个月， 4℃保存可达5年以上，活性仅下降5％左右。由于具有这些稳定的理化性质，所以 其开发应用备受人们所关注。

除上述理化特性外，卵黄抗体还有其他重要的生物学特性。卵黄抗体浓度高于 血清IgG，单个卵黄(约15mL)含200mg左右的卵黄抗体，自卵黄中获得卵黄抗体 较实验动物血清方便。且卵黄抗体不与哺乳动物补体、Fc受体结合，也不与葡萄球 菌蛋白A(SPA)或链球菌蛋白G(SPG)结合，卵黄抗体还不与血清中的类风湿因 子(RF)结合，可提高免疫学检测的准确性。因而可用卵黄抗体检测粪便中的病毒， 因为粪便中经常含有大量SPA，用卵黄抗体检测可避免假阳性结果。卵黄抗体是独 特的IgG同种型抗体，同时哺乳动物组织结构较禽类组织具有高度免疫性，卵黄抗 体用于哺乳动物检测具有明显的优势，许多高度保守的抗原，在步入动物中仅产生 极小的免疫原性，却可用卵黄抗体进行区分，因此卵黄抗体可用于兽医和人类免疫 学的检测。

杨树皮类脂(Poplar Bark Lipid，PBL)是从杨树皮中提取的一种橙黄色脂溶性 物质，富含大量的多糖、有机酸、甾醇、磷脂、甙类及维生素等物质。多糖类具有 促胸腺体液反应、刺激网状内皮系统，提高机体特异性免疫反应能力；有机酸具有 增强机体免疫功能的作用，能够刺激和促进单核吞噬细胞功能，对抗免疫抑制对免 疫器官的抑制作用；甙类能够加速抗体的产生、促进淋巴细胞转化和增强网状内皮 系统功能等作用。这些物质在动物体内协调统一，大大提高动物体的免疫机能。

作为杨树皮的提取物，杨树皮类脂与大多数的中草药一样，也存在着双向性， 当使用剂量过大时，不但不能起到正向促进作用，相反免疫器官会出现免疫抑制作 用，因此，合适的剂量是发挥杨树皮类脂免疫增强作用的关键所在。

法氏囊作为最重要的禽的中枢免疫器官，其发育的状况、淋巴细胞发育程度、 分化成熟程度将直接影响到制备法氏囊抗体水平。适量的杨树皮类脂对法氏囊发育 具有明显的促进作用。由于杨树皮类脂成分中含有大量的必需氨基酸、维生素、甾 醇等，这些营养物质正是免疫器官发育过程中不可或缺的组分，通过饲喂适量的杨 树皮类脂，可以很好的促进法氏囊等免疫器官的发育，刺激并促进各淋巴细胞的分 裂与增值，使法氏囊淋巴组织与淋巴细胞具有较强的生物学活性，从而整体提高法 氏囊产生免疫应答，分泌抗体的水平，高水平表达的抗体可通过体液循环到达卵巢， 并在卵黄形成阶段被收集，经过卵的各个形成过程，最终以卵黄抗体的形式得到保 存。

发明内容

本发明的目的是提供一种鸡法氏囊抗体的制备方法。

根据本发明的鸡法氏囊抗体的制备方法，包括以下步骤：