[发明专利]一种沉香诱导剂及其制备方法在审
申请号: | 200910241212.8 | 申请日: | 2009-12-02 |
公开(公告)号: | CN101731282A | 公开(公告)日: | 2010-06-16 |
发明(设计)人: | 魏建和;张争;杨云;孟慧;高志晖;陈伟平;冯锦东;陈怀琼 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院药用植物研究所 |
主分类号: | A01N63/04 | 分类号: | A01N63/04;A01P21/00 |
代理公司: | 北京捷诚信通专利事务所 11221 | 代理人: | 魏殿绅 |
地址: | 100193 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 沉香 诱导剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种沉香诱导剂,其特征在于,所述沉香诱导剂包括白木香树活体茎、PDA培养基、马铃薯蔗糖培养基与白木香基质;
所述白木香基质是由以下百分比组分的材料构成:73%白木香树粉末、25%麸皮、1%蔗糖、0.5%碳酸钙、0.2%(NH4)2HPO4、0.2%K2HPO4、0.1%MgSO4·7H2O。
2.根据权利要求1所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述制备步骤包括:
A对活体茎干进行采样和分离培养,得到沉香诱导真菌;
B将沉香诱导真菌接种于培养基上,以得到所需接种体;
C将得到的接种体加入到基质中进行培养,形成沉香诱导剂。
3.根据权利要求2所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述执行步骤B之前还包括:将沉香诱导真菌接种于PDA平板培养基上,并置于黑暗条件温度为25℃培养5~7天后,进行沉香诱导真菌的形态学鉴定和分子生物学鉴定。
4.根据权利要求2所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述步骤A具体包括:将白木香树活体茎上正在形成沉香的部位割下,并经乙醇、升汞消毒后,置于PDA培养、分离、纯化进行保存。
5.根据权利要求2所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述步骤B具体包括:将沉香诱导菌原始菌株接种在PDA活化形成一级接种体,然后接种于马铃薯蔗糖液体培养基发酵得到二级接种体。
6.根据权利要求2或5所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述步骤C具体包括:将活化的二级接种体加入白木香基质中培养,并在30℃恒温、黑暗、通气条件下培养3~5天后,形成活性的沉香诱导剂。
7.根据权利要求2所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述白木香基质的制作步骤包括:将73%白木香树粉末、25%麸皮、1%蔗糖、0.5%碳酸钙、0.2%(NH4)2HPO4、0.2%K2HPO4、0.1%MgSO4·7H2O进行混合,加水浸泡24~36小时,在121℃、0.11MPa/cm2高温高压灭菌1个小时,冷却后制成白木香基质培养基。
8.根据权利要求5所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述马铃薯蔗糖液体培养基的制作步骤包括:取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml煮沸30min后,滤去马铃薯块,将滤液补足至1000ml,加蔗糖20g,琼脂15g,溶化后分装,并调pH值至5.5、温度为121℃、高压为0.11MPa/cm2下灭菌15min。
9.根据权利要求5所述的沉香诱导剂的制备方法,其特征在于,所述沉香诱导菌菌株为可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)。
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