[发明专利]一种提高法夫酵母细胞内虾青素含量的法夫酵母培养方法

权利要求书

1.一种提高法夫酵母细胞内虾青素含量的法夫酵母培养方法，其特 征在于该方法的步骤如下：

A、PDA固体斜面培养基配制如下：200g马铃薯经洗净去皮切碎后， 加水1000ml煮沸半个小时，用纱布过滤，其滤液再加20g葡萄糖，混匀 后用去离子水补充液体体积至1000ml，在温度115℃下灭菌15分钟，得 到PDA液体培养基，往该PDA液体培养基中加入15g琼脂，待琼脂溶解、 凝固后得到PDA固体培养基；

B、配制种子培养基：将36-44g葡萄糖、3.6-4.4g酵母粉、2.0-2.8g尿 素、1.6-2.2g磷酸二氢钾、0.4-0.6g硫酸镁七水合物溶解于蒸馏水，定溶至 1000ml，调节pH至5.8-6.2；

C、配制发酵培养基：将100-120g葡萄糖、3.6-4.4g酵母粉、0.4-0.8g 尿素、1.6-2.2g磷酸二氢钾、0.4-0.6g硫酸镁七水合物溶解于蒸馏水，定溶 至1000ml，调节pH至5.8-6.2；

D、培养条件与方法

(1)种子制备：将含有法夫酵母野生菌株JCM9042的菌液涂布在步 骤(A)制备的PDA固体培养基平板上，在温度20-23℃下进行斜面培养 70-80小时，然后置于温度3-5℃下保存；

(2)一级种子培养：从上述(1)得到的法夫酵母野生菌株JCM9042固 体斜面上挑取菌苔接种入所述种子培养基中，在温度20-23℃及摇床振荡 速度180-220rpm下培养3-4天；

(3)二级种子培养：上述(2)得到的一级种子以种子培养基体积计按 照8-12％接种量加到所述的种子培养基中，在温度20-23℃与振荡速度 180-220rpm下培养34-40小时；

(4)发酵培养：上述(3)得到的二级种子以发酵培养基体积计按照 4-8％接种量加到所述的发酵培养基中，在温度20-23℃与振荡速度 180-200rpm下培养14-18小时，加入麦角甾醇合成抑制剂，再接着培养 88-112小时，得到法夫酵母野生菌株JCM9042的发酵液；

所述的麦角甾醇合成抑制剂是一种或多种选自氟康唑或特比奈芬的 麦角甾醇合成抑制剂，所述的麦角甾醇合成抑制剂加入量达到在发酵培养 基中的浓度为10-100mg/L。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于将36-44g葡萄糖、4.0g 酵母粉、2.4g尿素、2.0g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁七水合物溶于蒸馏水中， 并定容至1000ml，制备得到所述的种子培养基。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于将110g葡萄糖、4.0g酵 母粉、0.6g尿素、2.0g磷酸二氢钾、0.5g硫酸镁七水合物溶于蒸馏水中， 并定容至1000ml，制备得到所述的发酵培养基。