[发明专利]一种小麦叶锈菌单克隆抗体及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术，特别是涉及一种小麦叶锈菌单克隆抗体及其制备方法与应用。 

背景技术

小麦锈病包括致病菌包括小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)、小麦叶锈菌(Puccinia triticina f.sp.tritic)和小麦秆锈菌(Puccicinia graminis f.sp.tritici)，是一类世界性禾谷类作物的重要病害。小麦锈病具有发生区域广、暴发性强、流行频率高、危害损失重等特点，严重威胁着我国小麦的生产安全，而在我国以小麦条锈病的发生最为广泛，是影响我国小麦生产安全的首要病害，主要发生在西北、西南、长江中下游和华北等有关省(市、自治区)，每年发生面积约6000万亩，经大力防治后仍年均减产小麦10亿公斤左右；其次是小麦叶锈病，在西南和长江流域一带发生最重，华北和东北地区每年也有较重危害，而小麦叶锈病中，小麦叶锈菌生理小种或致病类型以PHT、THT两个小种为主(四川农业大学，蒲志刚，硕士论文“小麦叶锈菌群体毒性与DNA多态性关系分析及生理小种分子鉴定研究”2004)，；小麦秆锈病过去主要分布在东南沿海、长江流域和福建、广东、广西的冬麦区及东北、内蒙古等春麦区发生流行(李振岐和曾士迈，2000)，通过沿海地区病菌越冬菌源基地治理和洛夫林系统抗病品种的广泛种植，近30年来基本控制了该病害的流行危害，但在西南、淮北和东北等局部地区每年仍有不同程度的发生。 

病害的早期诊断检测是准确测报和有效防控的基础和前提。长期以来，锈病的诊断主要基于病原菌的生物学及病害症状的特征，其预测预报主要基于定期、大规模的田间病叶调查和室内病菌小种的活体分离、培养和鉴定。而条锈病和叶锈病的苗期症状区别不甚明显，一些基层植保人员常常将二者混淆；在小麦锈病潜育阶段，寄主的发病症状不易观察，难以界定初侵染的时期和规模。这些用于锈病诊断及病情测报的传统方法不仅耗时费工，且其准确性和可靠度在很大程度上取决于调查测报人员的经验积累与技术水平，难以满足病害的快速、高通量诊断检测实际需求。因此，有必要研发简单易行、灵敏准确的小麦锈病快速诊断和检测技术，其于鉴别病害、提高病害预测预报的准确度均具有重要的理论意义和实际应用价值。 

目前，中国农业科学院植物保护研究所麦类病害实验室已经针对这一生产中面临的实际问题，建立了小麦条锈菌和叶锈菌种的特异性分子诊断检测技术(Cao et al.，2007；曹丽华等，2007)。然而，该类基于PCR扩增的病菌核酸检测技术不但需要配置一些特殊仪器如PCR仪、凝胶电泳装置等，且对操作人员的技术水平要求较高，难以在众多基层植保科技工作者和技术人员中推广应用。