[发明专利]myostatin基因第三外显子单碱基突变的快速检测方法

权利要求书

1.一种检测牛Myostatin基因第三外显子SNP位点的引物，其 包括分别扩增G938A单碱基多态位点的上游序列和下游序列的两组 PCR引物对，其中各有一条为针对突变位点的错配引物，该引物的3’ 末端位于突变位点上，所述引物为：

向突变位点下游的错配引物：MF 5’-GCCAATTACTGCTCTGG CTAATA-3’，

其下游引物：MR 5’-ATGGCTGGAATCTTCCCGTAT-3’；

向突变位点上游的错配引物：WR 5’-GATGCTGTCGTTACCCT CTAAC-3’，

其上游引物：WF 5’-CTTTTGCAGGAATACAACGTCAC-3’。

2.含有权利要求1所述引物的检测试剂盒。

3.一种检测牛Myostatin基因第三外显子SNP位点的方法，其 采用权利要求1所述的引物或权利要求2所述的试剂盒扩增牛DNA 样品，并检测扩增产物。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，采用权利要求1所 述引物进行PCR扩增后，进行琼脂糖凝胶电泳检测，其中，呈现185bp 和262bp两条带的为纯合突变型，呈现122bp和262bp两条带的为纯 合野生型，呈现122bp、185bp和262bp三条带的为杂合子。

5.如权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述牛DNA 样品为采用Proteinase K裂解法制备得到的毛囊基因组DNA样品。

6.如权利要求3或4所述的方法，其特征在于，PCR反应程序 为：94℃4min；94℃5s，52～53℃5s，72℃5s，30个循环；72℃4min， 降温至4℃。