[发明专利]抗肿瘤坏死因子受体1的单域抗体及其使用方法

权利要求书

1.一种肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)拮抗剂，所述拮抗剂能结合TNFR1并抑制通过TNFR1的信号转导，其中所述拮抗剂基本上不抑制TNFα与TNFR1的结合。

2.权利要求1的拮抗剂，其中所述拮抗剂在标准L929细胞毒性测定中抑制TNFα诱导的细胞死亡或者在标准HeLa IL-8测定中抑制TNFα诱导的IL-8的分泌。

3.权利要求1的拮抗剂，其中所述拮抗剂能结合人TNFR1。

4.权利要求1的的拮抗剂，其中所述拮抗剂能结合TNFR1的域1。

5.权利要求1的拮抗剂，其中所述拮抗剂是抗体或抗体片段。

6.权利要求1的拮抗剂，其中所述拮抗剂与TAR2m-21-23竞争性结合小鼠TNFR1。

7.权利要求1的TNFR1拮抗剂，其中所述拮抗剂与TAR2h-205竞争性结合人TNFR1。

8.权利要求1的拮抗剂，其中所述拮抗剂是域抗体(dAb)。

9.一种能结合人TNFR1和小鼠TNFR1的配体。

10.权利要求9的配体，其中所述配体包含TNFR1结合部分，其能结合人TNFR1和小鼠TNFR1的域1。

11.权利要求10的配体，其中所述结合部分是抗体或抗体片段。

12.权利要求11的配体，其中所述结合部分是dAb。

13.一种能特异性结合肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)的域抗体(dAb)单体，其中所述dAb单体与TNFR1结合的K_d为300nM～5pM，并且所述dAb单体包含与选自以下dAb的氨基酸序列具有至少约95％同源性的氨基酸序列：TAR2h-12(SEQ ID NO：32)、TAR2h-13(SEQ IDNO：33)、TAR2h-14(SEQ ID NO：34)、TAR2h-16(SEQ ID NO：35)、TAR2h-17(SEQ ID NO：36)、TAR2h-18(SEQ ID NO：37)、TAR2h-19(SEQ ID NO：38)、TAR2h-20(SEQ ID NO：39)、TAR2h-21(SEQ ID NO：40)、TAR2h-22(SEQ ID NO：41)、TAR2h-23(SEQ ID NO：42)、TAR2h-24(SEQ ID NO：43)、TAR2h-25(SEQ ID NO：44)、TAR2h-26(SEQ ID NO：45)、TAR2h-27(SEQ ID NO：46)、TAR2h-29(SEQ ID NO：47)、TAR2h-30(SEQ ID NO：48)、TAR2h-32(SEQ ID NO：49)、TAR2h-33(SEQ ID NO：50)、TAR2h-10-1(SEQ ID NO：51)、TAR2h-10-2(SEQ ID NO：52)、TAR2h-10-3(SEQ ID NO：53)、TAR2h-10-4(SEQ ID NO：54)、TAR2h-10-5(SEQ ID NO：55)、TAR2h-10-6(SEQ ID NO：56)、TAR2h-10-7(SEQ ID NO：57)、TAR2h-10-8(SEQ ID NO：58)、TAR2h-10-9(SEQ ID NO：59)、TAR2h-10-10(SEQ ID NO：60)、TAR2h-10-11(SEQ ID NO：61)、TAR2h-10-12(SEQ ID NO：62)、TAR2h-10-13(SEQ ID NO：63)、TAR2h-10-14(SEQ ID NO：64)、TAR2h-10-15(SEQ ID NO：65)、TAR2h-10-16(SEQ ID NO：66)、TAR2h-10-17(SEQ ID NO：67)、TAR2h-10-18(SEQ ID NO：68)、TAR2h-10-19(SEQ ID NO：69)、TAR2h-10-20(SEQ ID NO：70)、TAR2h-10-21(SEQ ID NO：71)、TAR2h-10-22(SEQ ID NO：72)、TAR2h-10-29(SEQ ID NO：74)、TAR2h-10-31(SEQ ID NO：75)、TAR2h-10-35(SEQ ID NO：76)、TAR2h-10-36(SEQ ID NO：77)、TAR2h-10-37(SEQ ID NO：78)、TAR2h-10-38(SEQ ID NO：79)、TAR2h-10-45(SEQ ID NO：80)、TAR2h-10-47(SEQ ID NO：81)、TAR2h-10-48(SEQ ID NO：82)、TAR2h-10-57(SEQ ID NO：83)、TAR2h-10-56(SEQ ID NO：84)、TAR2h-10-58(SEQ ID NO：85)、TAR2h-10-66(SEQ ID NO：86)、TAR2h-10-64(SEQ ID NO：87)、TAR2h-10-65(SEQ ID NO：88)、TAR2h-10-68(SEQ ID NO：89)、TAR2h-10-69(SEQ ID NO：90)、TAR2h-10-67(SEQ ID NO：91)、TAR2h-10-61(SEQ ID NO：92)、TAR2h-10-62(SEQ ID NO：93)、TAR2h-10-63(SEQ ID NO：94)、TAR2h-10-60(SEQ ID NO：95)、TAR2h-10-55(SEQ ID NO：96)、TAR2h-10-59(SEQ ID NO：97)、TAR2h-10-70(SEQ ID NO：98)、TAR2h-34(SEQ ID NO：373)、TAR2h-35(SEQ ID NO：374)、TAR2h-36(SEQ ID NO：375)、TAR2h-37(SEQ ID NO：376)、TAR2h-38(SEQ ID NO：377)、TAR2h-39(SEQ ID NO：378)、TAR2h-40(SEQ IDNO：379)、TAR2h-41(SEQ ID NO：380)、TAR2h-42(SEQ ID NO：381)、TAR2h-43(SEQ ID NO：382)、TAR2h-44(SEQ ID NO：383)、TAR2h-45(SEQ ID NO：384)、TAR2h-47(SEQ ID NO：385)、TAR2h-48(SEQ IDNO：386)、TAR2h-50(SEQ ID NO：387)、TAR2h-51(SEQ ID NO：388)、TAR2h-66(SEQ ID NO：389)、TAR2h-67(SEQ ID NO：390)、TAR2h-68(SEQ ID NO：391)、TAR2h-70(SEQ ID NO：392)、TAR2h-71(SEQ IDNO：393)、TAR2h-72(SEQ ID NO：394)、TAR2h-73(SEQ ID NO：395)、TAR2h-74(SEQ ID NO：396)、TAR2h-75(SEQ ID NO：397)、TAR2h-76(SEQ ID NO：398)、TAR2h-77(SEQ ID NO：399)、TAR2h-78(SEQ IDNO：400)、TAR2h-79(SEQ ID NO：401)和TAR2h-15(SEQ ID NO：431)。

14.一种能特异性结合肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)的域抗体(dAb)单体，其中所述dAb单体与TNFR1结合的K_d为300nM～5pM，并且所述dAb单体包含与选自以下dAb的氨基酸序列具有至少约95％同源性的氨基酸序列：TAR2h-131-8(SEQ ID NO：433)、TAR2h-131-24(SEQ ID NO：434)、TAR2h-15-8(SEQ ID NO：435)、TAR2h-15-8-1(SEQ ID NO：436)、TAR2h-15-8-2(SEQ ID NO：437)、TAR2h-185-23(SEQ ID NO：438)、TAR2h-154-10-5(SEQ ID NO：439)、TAR2h-14-2(SEQ ID NO：440)、TAR2h-151-8(SEQ ID NO：441)、TAR2h-152-7(SEQ ID NO：442)、TAR2h-35-4(SEQ ID NO：443)、TAR2h-154-7(SEQID NO：444)、TAR2h-80(SEQ ID NO：445)、TAR2h-81(SEQ ID NO：446)、TAR2h-82(SEQ ID NO：447)、TAR2h-83(SEQ ID NO：448)、TAR2h-84(SEQ ID NO：449)、TAR2h-85(SEQ ID NO：450)、TAR2h-86(SEQ ID NO：451)、TAR2h-87(SEQ ID NO：452)、TAR2h-88(SEQ IDNO：453)、TAR2h-89(SEQ ID NO：454)、TAR2h-90(SEQ ID NO：455)、TAR2h-91(SEQ ID NO：456)、TAR2h-92(SEQ ID NO：457)、TAR2h-93(SEQ ID NO：458)、TAR2h-94(SEQ ID NO：459)、TAR2h-95(SEQ IDNO：460)、TAR2h-96(SEQ ID NO：461)、TAR2h-97(SEQ ID NO：462)、TAR2h-99(SEQ ID NO：463)、TAR2h-100(SEQ ID NO：464)、TAR2h-101(SEQ ID NO：465)、TAR2h-102(SEQ ID NO：466)、TAR2h-103(SEQ ID NO：467)、TAR2h-104(SEQ ID NO：468)、TAR2h-105(SEQ ID NO：469)、TAR2h-106(SEQ ID NO：470)、TAR2h-107(SEQ ID NO：471)、TAR2h-108(SEQ ID NO：472)、TAR2h-109(SEQ ID NO：473)、TAR2h-110(SEQ ID NO：474)、TAR2h-111(SEQ ID NO：475)、TAR2h-112(SEQ ID NO：476)、TAR2h-113(SEQ ID NO：477)、TAR2h-114(SEQ ID NO：478)、TAR2h-115(SEQ ID NO：479)、TAR2h-116(SEQ ID NO：480)、TAR2h-117(SEQ ID NO：481)、TAR2h-118(SEQ ID NO：482)、TAR2h-119(SEQ ID NO：483)、TAR2h-120(SEQ ID NO：484)、TAR2h-121(SEQ ID NO：485)、TAR2h-122(SEQ ID NO：486)、TAR2h-123(SEQ ID NO：487)、TAR2h-124(SEQ ID NO：488)、TAR2h-125(SEQ ID NO：489)、TAR2h-126(SEQ ID NO：490)、TAR2h-127(SEQ ID NO：491)、TAR2h-128(SEQ ID NO：492)、TAR2h-129(SEQ ID NO：493)、TAR2h-130(SEQ ID NO：494)、TAR2h-131(SEQ ID NO：495)、TAR2h-132(SEQ ID NO：496)、TAR2h-133(SEQ ID NO：497)、TAR2h-151(SEQ ID NO：498)、TAR2h-152(SEQ ID NO：499)、TAR2h-153(SEQ ID NO：500)、TAR2h-154(SEQ ID NO：501)、TAR2h-159(SEQ ID NO：502)、TAR2h-165(SEQ ID NO：503)、TAR2h-166(SEQ ID NO：504)、TAR2h-168(SEQ ID NO：505)、TAR2h-171(SEQ ID NO：506)、TAR2h-172(SEQ ID NO：507)、TAR2h-173(SEQ ID NO：508)、TAR2h-174(SEQ ID NO：509)、TAR2h-176(SEQ ID NO：510)、TAR2h-178(SEQ ID NO：511)、TAR2h-201(SEQ ID NO：512)、TAR2h-202(SEQ ID NO：513)、TAR2h-203(SEQ ID NO：514)、TAR2h-204(SEQ ID NO：515)、TAR2h-185-25(SEQ ID NO：516)、TAR2h-154-10(SEQ ID NO：517)和TAR2h-205(SEQ ID NO：627)。