[发明专利]一种微生物的固定化方法

权利要求书

1.一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：培养基根据菌种对所处理焦化废水中有毒污染物的耐受浓度添加焦化废水，保持固定化细菌对所处理焦化废水中有毒污染物的耐受性，采用固体发酵法进行细菌固定化产品的制备，包括以下工序：

(1)准备工序：从焦化厂A²/O厌氧-缺氧-好氧污水处理工艺的缺氧池活性污泥中，采用以焦化废水代替蒸馏水配制的牛肉膏蛋白胨固体培养基DM₁₀₀分离纯化出反硝化细菌，将菌种的扩大培养基调节pH值后，与粒度大于80目的黄豆皮或稻谷壳进行混合，黄豆皮或稻谷壳与扩大培养基的重量体积比g/ml为1∶5-8，放入高压蒸汽锅中于115℃，灭菌30分钟，形成固体发酵湿基；所述的扩大培养基中添加焦化废水，培养基苯酚浓度为86mg/L，氰化物为16mg/L；

所述的牛肉膏蛋白胨固体培养基DM₁₀₀：牛肉膏10g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，琼脂15～20g/L，以焦化废水代替蒸馏水，调节pH到7.4-7.6，121℃灭菌20分钟；

(2)固体发酵：接种液态培养处于对数生长期的相应的菌株原菌液，接种量为湿基重量的2％；含水率控制在75-85％，进行发酵；反硝化菌35℃恒温发酵，每天搅拌翻动一至二次，pH＝7.5-8.0，培养时间t：5-6天；

(3)中止发酵：采用干燥脱除外水中止发酵，采用天然干燥、或鼓风干燥至恒重；

(4)保存：储存在阴凉、干燥、通风、避光处、避免和有毒物品一起储运。

2.根据权利要求1所述的一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：将黄豆皮或稻谷壳用80目筛子过筛，收取筛上产品为细菌固体发酵固定化载体，筛上产品中小于80目的细粒物含量＜1.5％(重量)。 

3.根据权利要求1所述的一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：(1)准备工序中，用焦化废水配制培养基。

4.根据权利要求1所述的一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：在(3)中止发酵过程中，干燥温度小于60℃。

5.一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：培养基根据菌种对所处理焦化废水中有毒污染物的耐受浓度添加焦化废水，保持固定化细菌对所处理焦化废水中有毒污染物的耐受性，采用固体发酵法进行细菌固定化产品的制备，包括以下工序：

(1)准备工序：从焦化厂A²/O污水处理工艺二沉池活性污泥中以焦化废水代替蒸馏水配制的牛肉膏蛋白胨固体培养基DM₁₀₀分离纯化出硝化细菌；将相应菌种的扩大培养基调节pH值后，与粒度大于80目的黄豆皮或稻谷壳进行混合，黄豆皮或稻谷壳与扩大培养基的重量体积比g/ml为1∶5-8，放入高压蒸汽锅中于115℃，灭菌30分钟，形成固体发酵湿基；所述的扩大培养基中添加焦化废水，培养基苯酚浓度为86mg/L，氰化物为16mg/L；

所述的牛肉膏蛋白胨固体培养基DM₁₀₀：牛肉膏10g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，琼脂15～20g/L，以焦化废水代替蒸馏水，调节pH到7.4-7.6，121℃灭菌20分钟；

(2)固体发酵：接种液态培养处于对数生长期的相应的菌株原菌液，接种量为湿基重量的2％；含水率控制在75％或85％以下，进行发酵；每平方米通风量为180或240m³/h；30℃恒温发酵，初始pH＝8.0，进入对数生长期后pH值变化速度很快，每2h检测一次pH，补加0.1mol/L NaOH调节pH控制在7.5-8.5；培养时间t：5-6天；

(3)中止发酵：采用干燥脱除外水中止发酵，采用天然干燥、或鼓风干燥至 恒重；

(4)保存：储存在阴凉、干燥、通风、避光处、避免和有毒物品一起储运。

6.根据权利要求5所述的一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：将黄豆皮或稻谷壳用80目筛子过筛，收取筛上产品为细菌固体发酵固定化载体，筛上产品中小于80目的细粒物含量＜1.5％(重量)。

7.根据权利要求5所述的一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：(1)准备工序中，用焦化废水配制培养基。

8.根据权利要求5所述的一种降解焦化废水细菌的固定方法，其特征在于：在(3)中止发酵过程中，干燥温度小于60℃。