[发明专利]一种对金藻的电击转化方法无效
| 申请号： | 200910255769.7 | 申请日： | 2009-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN101736025A | 公开（公告）日： | 2010-06-16 |
| 发明（设计）人： | 郑明刚;郑立;崔志松;王玲;韩笑天 | 申请（专利权）人： | 国家海洋局第一海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N13/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266061 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 电击 转化 方法 | ||
1.一种对金藻的电击转化方法，该方法通过对金藻进行抽滤收集、预处理、输入电压、质粒浓度、电击缓冲液提高了转化效率，其特征包含如下步骤：
(1)提供金藻藻株Isochrysis sp.CCMM5001、外源性DNA、电转缓冲液；
(2)金藻抽滤收集及电转化前的预处理；
(3)电转化需要的质粒、鲑鱼精DNA的浓度的制备、电击条件设定；
(4)转化后的培养条件；
2.根据权利要求1所述的对金藻的电击转化方法，其特征在于：所述的外源性DNA为pCAMBIA1303质粒。
3.根据权利要求1所述的对金藻的电击转化方法，其特征在于：所述的电转缓冲液蔗糖-HEPES组成为：0.5-1.0mM蔗糖，0.5-1.0mMHEPES，PH6.5-8.0。
4.根据权利要求1所述的对金藻的电击转化方法，其特征在于：所述的抽滤所需要的压力为0.01-0.03Mpa，所用的滤膜为：孔径8μm，规格50mm。
5.根据权利要求1所述的对金藻的电击转化方法，其特征在于：所述的质粒浓度为7-10μg/ml，鲑鱼精DNA的浓度为：4-6μg/ml。
6.根据权利要求1所述的对金藻的电击转化方法，其特征在于：所述的电击条件为1.4-2.5KV，脉冲时间为5-10ms。
7.根据权利要求1所述的对金藻的电击转化方法，其特征在于：所述的转化后细胞暗恢复培养23-25h，加入卡那霉素，光/暗12/12h培养。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于国家海洋局第一海洋研究所，未经国家海洋局第一海洋研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200910255769.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
