[发明专利]3’,5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域。确切地说它是一种3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体及其制备方法。

背景技术

环胞苷是临床上常用的抗白血病药物，但是，环胞苷易被肝脏中的胞嘧啶脱氨酶脱氨降解而失去抗癌活性。为了维持有效的血药浓度，必须对患者连续多次地给药，造成骨髓抑制和病人消瘦。为提高环胞苷的疗效，克服其在体内易脱氨降解的缺点，发明人对环胞苷的分子结构进行了改造，在其戊糖环上连接了两条月桂酸脂肪链，合成了3’，5’-环胞苷二月桂酸酯，其分子结构见说明书附图1。

实验证明，3’，5’-环胞苷二月桂酸酯的抗癌活性高于其母体药物环胞苷。由于在环胞苷的戊糖环的3’，5’位上连接了两条月桂酸脂肪链，所以3’，5’-环胞苷二月桂酸酯分子的水溶性差，造成了给药难和吸收难的问题。发明人利用脂质体作为药物载体，自主研制了3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体，并对其显微形态、包封率、粒度分布及药效学进行了研究。结果表明，脂质体颗粒呈球型，粒度分布均匀，包封率高，抗癌活性比游离的3’，5’-环胞苷二月桂酸酯提高了1.68倍。

发明内容

本发明的目的是提供3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体及其制备方法，以改善3’，5’-环胞苷二月桂酸酯给药难和吸收难的缺陷，同时提高药物的疗效。由于脂质体本身对人体无毒，无免疫原性，适合于生物体内降解，在血液中稳定。通过脂质体的包裹技术，可以保护被包裹的3’，5’-环胞苷二月桂酸酯在血液中不被稀释和降解，提高药物的生物利用度，实施高效安全的程序精确释药模式。

本发明是由3’，5’-环胞苷二月桂酸酯与作为辅料的天然卵磷脂、胆固醇、稳定剂制备而成的脂质体。制备方法采用反相蒸发法。制备脂质体所采用的磷脂均是天然卵磷脂(蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、猪脑卵磷脂)。其组成包括3’，5’-环胞苷二月桂酸酯、天然卵磷脂、胆固醇及稳定剂。其中卵磷脂与胆固醇的摩尔比为1∶1，膜材与3’，5’-环胞苷二月桂酸酯的摩尔比为2∶1，稳定剂二硬脂酰基磷脂酰胆碱与磷脂的比例为0.5∶1。

本发明的优点是：合成了3’，5’-环胞苷二月桂酸酯，并发展了3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体释药系统，改善了3’，5’-环胞苷二月桂酸酯因水溶性差导致的给药难和吸收难的缺陷，同时提高了药物的疗效。本发明制备的脂质体具有颗粒呈球型，粒度分布均匀，包封率高的特点。

附图说明

本发明说明书附图共4幅，图1为3’，5’-环胞苷二月桂酸酯的分子结构。图2为3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体的透射电镜照片。图3为3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体分别在室温及37℃条件下经72小时温育后的粒度分布图。图4为空白脂质体分别在室温及37℃条件下经72小时温育后的粒度分布图。

具体实施方式

本发明的具体制备方法，由以下实施实例举例说明。但本发明的的保护范围不局限于此。

实施例

(一)制备

采用反相蒸发法制备3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体。天然卵磷脂经氧化铝柱层析分离得纯品，将卵磷脂∶胆固醇∶二硬脂酰基磷脂酰胆碱按1∶1∶0.5的摩尔比置于鸡心瓶中，加入适量的氯仿使其溶解。准确称取所需量的3’，5’-环胞苷二月桂酸酯，加入同一鸡心瓶中使其溶解，45℃氮气气氛中减压旋转蒸发除去氯仿，在鸡心瓶内壁上形成干膜，将乙醚及PH值为7.15的磷酸缓冲溶液按3∶1的体积比加入(先加入乙醚使脂膜溶解，然后再加入磷酸盐缓冲溶液)，经超声波清洗仪20min的超声分散后，将得到的混合物在旋转蒸发仪上旋转蒸发成胶状除去乙醚，再加入所需量的磷酸缓冲溶液震荡5min，在25-30℃的条件下继续在旋转蒸发仪上旋转蒸发10min彻底除去有机溶剂，即制得乳白色的3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体悬浮液。最后充氮气至乙醚味消失。未包封的3’，5’-环胞苷二月桂酸酯通过Sephadex G-75(葡聚糖凝胶G-75)柱(30cm×1.5cm)以磷酸缓冲溶液为洗脱液洗脱除去。

(二)显微形态鉴定

3’，5’-环胞苷二月桂酸酯脂质体样品用磷钨酸溶液ω(P₂O₅24(WO₃)44(H₂O)＝1％染色，用JEM-1200EX透射电镜拍照。附图1显示，脂质体颗粒呈球型。

(三)包封率的测定