[发明专利]人源化抗-NGF抗体

说明书

本分案申请是基于申请号为200480040565.7，申请日为2004年12 月23日，发明名称为“抗体人源化的方法以及由此获得的人源化抗体” 的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及一种通过确定和比较三维结构的方式进行抗体人源化 的方法，由此获得的人源化抗体及其在体内治疗和诊断中的用途。

背景技术

在人类中动物来源的单克隆抗体的治疗性和诊断性应用具有基本 禁忌征候，特别是对于必需重复给药的治疗方案。具体地，鼠单克隆抗 体具有相对短的半衰期，并且当用于人类时，缺乏一些免疫球蛋白的基 本功能特性，如补体依赖性细胞毒性和细胞介导的细胞毒性。

另外，如果注射入患者体内的话，非人源的单克隆抗体包含免疫原 性氨基酸序列。许多研究显示在注射外源抗体后，受试者产生针对抗体 本身的相当强烈的免疫反应(称为HAMA-人抗鼠抗体-反应)，形成免疫 复合物，药物动力学改变，产生变应性反应等，完全消除了它的治疗性 用途。而且，考虑到在小鼠或在其它哺乳动物中为了不同病状的治疗而 开发出来的不同单克隆抗体(因而对于人具有抗原性)的生长数目，由 于交叉反应性，也是为了不相关疗法而进行的治疗可以是无效的或者甚 至是危险的。尽管所谓嵌合性抗体(可变的鼠区域连接到人源的恒定区) 的生产已经产生了一些阳性结果，但仍然余留着显著的免疫原性问题。

在人类治疗性应用领域人源化抗体相对于动物源的抗体具有至少 三种潜在的优点。第一，人源的效应区，能够更好地与人免疫系统的其 它部分相互作用，通过补体依赖性细胞毒性，或细胞介导的抗体依赖性 细胞毒性更加有效地破坏靶细胞。而且，人免疫系统并不将人源化抗体 的构架或恒定区(C)识别为外源性的，因此相对于针对鼠抗体(完全 是外来的)的抗体反应和相对于由嵌合性抗体(部分外来的)诱导的反 应，针对人源化抗体的抗体反应得以最小化。

已经报道了注射入人体内的鼠抗体比正常抗体具有短得多的半衰 期(Shaw等，1987)。人源化的抗体与天然人抗体具有非常相似的半衰 期，这样就允许更少次数的给药和更低的剂量。

人源化作用的基本原理为改变抗原识别，即CDR结构域，在人免疫 球蛋白的环境中的特异性(“CDR移植”，Winter和Milstein)。已经 报道了人源化抗体的几个例子，其是为了试图解决免疫原性的问题而生 产的(Maeda等，1991；Singer等，1993；Tempest等，1994； Kettleborough等，1991；Hsiao等，1994；Baca等，1997；Leger等， 1997；Ellis等，1995；Sato等，1994；Jones等，1986；Benhar等，1994； Sha and Xiang，1994；Shearman等，1991；Rosok等，1996；Gussow & Seemann，1991；Couto等，1994；Kashmiri等，1995；Baker等，1994； Riechmann等，1988；Gorman等，1991；Verhoeyen等，1988；Foote & Winter，1992；Lewis & Crowe，1991；Co等，1991；Co等，1991； Verhoeyen等，1991；Eigenbrot等，1994；Hamilton等，1997；Tempest 等，1995；Verhoeyen等，1993；Cook等，1996；Poul等，1995；Co 等，1992；Graziano等，1995；Presta等，1993；Hakimi等，1993； Roguska等，1996；Adair等，1994；Sato等，1993；Tempest等，1991； Sato等，1996；Kolbinger等，1993；Zhu和Carter，1995；Sims等， 1993；Routledge等，1991；Roguska等，1994；Queen等，1989；Carter 等，1992)。