[发明专利]一种从啤酒酵母中提取核酸的方法无效
申请号: | 200910263480.X | 申请日: | 2009-12-15 |
公开(公告)号: | CN101717774A | 公开(公告)日: | 2010-06-02 |
发明(设计)人: | 何忠泽 | 申请(专利权)人: | 刘天银 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H21/00;C07H1/06 |
代理公司: | 成都天嘉专利事务所(普通合伙) 51211 | 代理人: | 徐丰 |
地址: | 618000 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 啤酒 酵母 提取 核酸 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种提取核酸的方法,更具体地说,本发明涉及一种从啤酒酵母中提取核酸的方法及其应用。
背景技术
核酸即脱氧核糖核酸DNA及核糖核酸RNA。DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础,RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用。核酸是生命的最基本物质之一,是生命的根源。核酸是基因营养素、养育修复基因,具有防病治病抗衰老的功能性食品。
核酸的原料主要是从动物的肝脏、脑胸腺、鱼精、微生物以及蜜糖中提取,成本高。国外把核酸制品称为“贵族营养健康食品”、“神经营养因子”、“贵族营养”等。由于核酸提取困难,提取成本较高,收率低,所以售价也比较高,普通老百姓不易接受。且目前核酸提取多只能提取出RNA。
发明内容
本发明旨在克服上述缺陷,提供一种从啤酒酵母中提取核酸的方法。该方法易于实施,且成本较低,收率高,产品纯度高,既能提取RNA,又能提取DNA。
为了实现以上发明目的,本发明技术方案如下:
一种从啤酒酵母中提取核酸的方法,其特征在于:包括如下顺序的步骤:
A、取啤酒酵母悬浮于质量百分比为12-20%的NaOH溶液中搅拌,酵母与NaOH溶液的质量体积比为1∶1.2-1∶2.5,将酵母和NaOH置于乳钵中研细混匀,移至锥形瓶中,沸水浴加热20-40min后室温下冷却,然后以3000r/min离心10-30min。
B、离心后将上清液缓慢倒入1-5倍体积的0.3mol/l HCl和95%乙醇的混合液体中,0.3mol/l HCl和95%乙醇的体积比为1∶4,边加边搅拌至沉淀完全后再以3000r/min离心10-30min,弃去上清液。
C、将步骤B中的沉淀物用95%乙醇洗涤2次,再用无水乙醚洗涤1次后沉淀,然后将洗涤后的沉淀物和洗涤剂移入布氏漏斗中进行抽滤。
D、将滤出的沉淀物在60-80℃下干燥1-5h,即得DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)粗品,密封保存或即刻使用。
本发明技术方案带来的有益效果:
1、提取方法简便、易实施,且成本较低。
2、与一般用啤酒废液和啤酒提取的方法相比,本发明不仅可以提取RNA,还同时提取DNA,且杂质少,纯度高。
3、提取出的活性核酸提取物可用于核酸饮料的制备,制成的核酸饮料价格较低,易于推广。
具体实施方式
实施例1
从袋中取15g出酵母,将酵母悬浮于19.5ml 14%NaOH溶液中搅拌,将酵母和NaOH置于乳钵中研细混匀,移至锥形瓶中,沸水浴加热22min后室温下冷却。以3000r/min离心15min,将上清液缓慢加入40ml比例为1∶4的0.3mol/lHCL和95%乙醇混合液体中,边加边搅拌至沉淀完全后再以3000r/min离心12min,弃去上清液。将沉淀物用95%乙醇洗涤2次,再用无水乙醚1次后沉淀,将混合物移入布氏漏斗中抽滤,得沉淀物。将滤出的沉淀物在70℃下干燥1.5h,即得DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)粗品,密封保存或即刻使用。
实施例2
从袋中取出30g酵母,将酵母悬浮于45ml 16%NaOH溶液中搅拌,将酵母和NaOH置于乳钵中研细混匀,移至锥形瓶中,沸水浴加热30min后室温下冷却。以3000r/min离心20min,将上清液缓慢加入135ml比例为1∶4的0.3mol/lHCL和95%乙醇混合液体中,边加边搅拌至沉淀完全后再以3000r/min离心15min,弃去上清液。将沉淀物用95%乙醇洗涤2次,再用无水乙醚1次后沉淀,将混合物移入布氏漏斗中抽滤,得沉淀物。将滤出的沉淀物在73℃下干燥2h,即得DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)粗品,密封保存或即刻使用。
实施例3
从袋中取出40g酵母,将酵母悬浮于80ml 18%NaOH溶液中搅拌,将酵母和NaOH置于乳钵中研细混匀,移至锥形瓶中,沸水浴加热35min后室温下冷却。以3000r/min离心25min,将上清液缓慢加入320ml比例为1∶4的0.3mol/l HCL和95%乙醇混合液体中,边加边搅拌至沉淀完全后再以3000r/min离心20min,弃去上清液。将沉淀物用95%乙醇洗涤2次,再用无水乙醚1次后沉淀,将混合物移入布氏漏斗中抽滤,得沉淀物。将滤出的沉淀物在77℃下干燥3h,即得DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)粗品,密封保存或即刻使用。
实施例4
从袋中取出60g酵母,将酵母悬浮于150ml 20%NaOH溶液中搅拌,将酵母和NaOH置于乳钵中研细混匀,移至锥形瓶中,沸水浴加热38min后室温下冷却。以3000r/min离心30min,将上清液缓慢加入750ml比例为1∶4的0.3mol/l HCL和95%乙醇混合液体中,边加边搅拌至沉淀完全后再以3000r/min离心25min,弃去上清液。将沉淀物用95%乙醇洗涤2次,再用无水乙醚1次后沉淀,将混合物移入布氏漏斗中抽滤,得沉淀物。将滤出的沉淀物在80℃下干燥4h,即得DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)粗品,密封保存或即刻使用。
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