[发明专利]稻蝗属特异性分子标记DNA序列及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及昆虫DNA序列，具体涉及稻蝗属物种DNA分子标记序列及其应用。

背景技术

稻蝗属昆虫是农业生产上的重要害虫，喜食水稻，对水稻生产为害极大，该属物种的准确鉴定是对其有效防治的前提。稻蝗属物种鉴定一直依赖于形态学和细胞学手段，由于该属物种形态性状存在多态性，在实际应用中很难获得稳定、统一的鉴定标准；细胞学方法由于制样程序和技术的要求较高，也难以得到该属物种特异性细胞学标记，因此，目前稻蝗属物种分类仍存在一定争议。同时，稻蝗属与斑腿蝗科内其它属的分类鉴定也存在一定的问题，例如，稻蝗属与伪稻蝗属、拟稻蝗属、籼蝗属、芋蝗属等形态上比较相似，难以准确区分，导致分类困难。

发明内容

本发明的目的是从稻蝗属基因组中克隆出稻蝗属物种特异性DNA分子遗传学标记，并用于稻蝗属物种鉴别。

本发明通过大量筛选RAPD分子标记，获得一条667bp稻蝗属物种共有的DNA条带，经对其克隆、测序和同源比较，设计引物并进行PCR扩增，获得550bp稻蝗属物种特异性DNA条带，该条带可作为分子遗传学标记，用于稻蝗属物种鉴别。

本发明获得的稻蝗属物种特异性分子标记DNA核苷酸序列为：

cgcgtacttc cgacttaagt ttatcatccc tgaaataaaa tcacataatc accatctgca    60

tgtagtgaca ctgtccatca gagcttctgt cctgctgtta actgtaagtg atttagtgcc    120

acacattctg cagtgtgaaa gtgaagttca cacttggaaa cgttgcgttc ttttaccgtt    180

tcagacggca tttcgctttt gtgcttagag tggcactctg ctggtagatc aaaataaatt    240

acttgacttt gttacttgtg actatcaata tatcacgtta cttttctgtc atattacctt    300

tttttagaga cgattcttat tgttagtttt cttcaaaggt tcgtatgctt tcatcaagcc    360

atagtaagtg tcatgtaaaa gctgttcttg ccgttgtttg tttcctcata gtaattgtat    420

gtgataaact gtgtgaatac ctcagagtgc atgctttgta acaaagctaa tacactgcac    480

gtctggacgt ccacgtaagg agtcgtggac tacttaatac tgatagaaag taatatatag    540

ggtattcaat tagattcaca cgaacaaaac tggttatttt aagaactaga cagagtggaa    600

ggtagtggat agcgactgag tctgcaaccg tctacagact caagtataca tcgctttgaa    660

gtacgcg                                                              667

本发明在对稻蝗属物种遗传分化的研究中，发现随机引物S823 5′-CGC GTA CTT C-3′可在稻蝗属不同物种扩增出一条667bp的稳定条带；根据DNA序列设计了一对可特异扩增稻蝗属物种的引物：

上游引物：TGTCCATCAGAGCTTCTGTCCTGCTG

下游引物：TGCAGACTCAGTCGCTATCCACTACC

用该引物扩增蝗总科各物种基因组DNA样本，有550bp扩增条带的，为稻蝗属物种样本。

本发明克服了常规形态性状及细胞学鉴定方法的不足，提供了对稻蝗属物种快速、准确鉴定的分子标记方法，为物种准确分类和害虫有效防治提供了方法和依据。

附图说明