[发明专利]一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法

权利要求书

1.一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

a、取丙酮丁醇蒸馏废水，加入质量分数为0.1-0.14％的尿素，以及质量分数为0.03-0.08％的工业磷酸，再加入质量浓度为98％的浓硫酸将pH值调至4.0-4.5，并灭菌20-30min，得到发酵培养基；

b、取质量分数为1.5-2.5％的葡萄糖、质量分数为0.2-0.8％的酵母膏、质量分数为0.5-1.5％的蛋白胨以及质量分数为1.5-2.5％的琼脂制成斜面培养基；

c、选取菌种置于斜面培养基中，培养出斜面菌种，所述菌种为产朊假丝酵母、热带假丝酵母和白地霉中的至少一种；

d、一级种子培养：将糖度为10-12°Brix的麦芽汁培养基作为一级种子培养基，并取100mL装于500mL的三角瓶中，取1-3环的斜面菌种装于三角瓶中，在温度为30℃的条件下，置于摇床频率为100-120r/min的往复摇床上培养12-16h；

e、二级种子培养：取丙酮丁醇蒸馏废水，加入质量分数为0.3-0.5％的蔗糖、质量分数为0.12-0.16％的尿素以及质量分数比为0.03-0.08％的工业磷酸，并用质量浓度为98％的浓硫酸将pH值调到4.5-5.0，得到二级种子培养基，取3L二级种子培养液置于5L血清瓶中，待一级种子培养完毕后接入血清瓶中，在温度为30℃的条件下培养12-16h；

f、三级种子培养：取35L步骤a中的发酵培养基装于50L的发酵罐内，待二级种子培养完毕后接入发酵罐内，在温度为28-30℃，搅拌速度为100-110r/min，通气量为1∶1.5(v/v)的条件下进行三级种子培养，培养时间为18-24h； 

g、发酵：取步骤a中的发酵培养基和步骤f中的三级培养种子液置于1m³的发酵罐中，在温度为28-30℃，搅拌转速为90r/min，通气量为1∶1.5(v/v)的条件下发酵18-24h得到菌体量为≥8g/L，粗蛋白的质量分数为42-52％，废水COD去除率为65-70％的发酵液；

h、分离浓缩：采用碟片式酵母分离机将发酵液浓缩为糖度为10-12°Brix的发酵液；

i、干燥粉碎：采用双滚筒干燥机对步骤h中的发酵液进行干燥，干燥温度为140-150℃，并粉碎使得干燥粉碎后的颗粒细度达到≤80目，含水量降低到8-10％，从而制得成品。

2.根据权利要求1所述的一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是：所述丙酮丁醇蒸馏废水为丙酮丁醇发酵液进过醪塔蒸馏所产生的COD为28000-32000mg/L，还原糖质量分数为0.4-0.5％，正丁醇、丙酮、乙醇三者总溶剂的质量分数小于0.02％的废水。

3.根据权利要求1或2所述的一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是：所述步骤a中的丙酮丁醇蒸馏废水为经过80目滤网过滤的废水。

4.根据权利要求1所述的一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是：所述步骤b中的葡萄糖的质量分数为2％，酵母膏的质量分数为0.5％，蛋白胨的质量分数为1％，琼脂的质量分数为2％。

5.根据权利要求1所述的一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是：所述步骤e中的丙酮丁醇蒸馏废水为经过80目板框过滤的废水。

6.根据权利要求1所述的一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产 单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是：所述步骤a中尿素的质量分数为0.12％，工业磷酸的质量分数为0.05％。

7.根据权利要求1所述的一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是：所述步骤e中蔗糖的质量分数为0.3％，尿素的质量分数为0.14％，工业磷酸的质量分数为0.05％。

8.根据权利要求1所述的一种以丙酮丁醇发酵废水为原料生产单细胞蛋白饲料的制备方法，其特征是：所述步骤f中的搅拌转速为100r/min。