[发明专利]高效去除水体中亚硝态氮、硝态氮和氨氮的施氏假单胞菌CY003及其应用

权利要求书

1.一种能去除水体中的氨态氮、硝态氮和亚硝态氮的施氏假单胞菌(Pseudomonasstutzeri)CY003，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为(CCTCC NO)：M 209196。

2.一种高效筛选反硝化菌的方法，包括下列步骤：

(1)、微生物选择富集培养：

将水样静置弃去上清液，取池塘污泥接种于加杜氏小管的试管中(反硝化培养基)，接种量为1～5％，在20～35℃温箱中培养2～3d，将其观察杜氏小管中是否有气体产生；对于把产气的试管，基本可以确定基本没有所需菌株。

(2)、取产气的试管，从中吸取0.1ml，梯度稀释至合适浓度，涂布在BTB固体培养基平板中，30℃温箱中培养2～3d，平板倒置；

(3)、从BTB培养基固体培养基中挑取蓝色单菌落，接种于反硝化硝化培养基液体培养基中，接种量5～10％，在30～35℃、120～180rpm的条件下恒温振荡培育2～3d，测定硝酸盐，亚硝酸盐的含量。硝态氮基本消耗的培养液，即为目的菌株。

(4)、取所筛目的菌株连续转接10代，测定其反硝化，确定是否遗传稳定，遗产稳定即为所需。

反硝化培养基：硝酸钾2.0g、七水合硫酸镁0.2g、磷酸氢二钾0.5g、酒石酸钾钠20g、蒸馏水1L、pH7.2(加20g琼脂即为固体培养基)，121℃湿热灭菌30分钟。

BTB筛选培养基：L-天冬酰胺酸1g、KNO₃(或者NaNO₂)1g、KH₂PO₄ 1g、琥珀酸钠8.5g、FeCl₂.6H₂O 0.05g、CaCl₂.2H₂O 0.2g、MgSO₄.7H₂O 0.07g、1ml/L BTB[pH指示剂溴百里酚](1％，溶于乙醇)，琼脂20g、pH 7.0～7.2。

3.权利要求1所述的菌株在水产养殖水体、景观水体和工业生活污水净化中的应用。

4.权利要求2所述的应用，其中包括水体中去除氨态氮、硝态氮及亚硝态氮中的应用。