[发明专利]重组猪霍乱沙门氏菌及二价基因工程疫苗与制备方法无效
| 申请号： | 200910273372.0 | 申请日： | 2009-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN101838627A | 公开（公告）日： | 2010-09-22 |
| 发明（设计）人： | 何启盖;库旭钢;陈冬焕;徐高原;陈焕春;金梅林 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学;武汉科前动物生物制品有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/34;C12N15/74;A61K39/295;A61K39/12;A61K39/112;A61P31/04;A61P31/20;C12R1/42 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 猪霍乱 沙门氏菌 二价 基因工程 疫苗 制备 方法 | ||
1.一株表达猪II型圆环病毒主要抗原Cap蛋白的重组猪霍乱沙门氏菌(Salmonellacholeraesuis)C501(pYA-Δ41ORF2)，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为：CCTCCNO：M209314。
2.一种重组猪霍乱沙门氏菌C501(pYA-Δ41ORF2)的制备方法，它包括下列步骤：
1)扩增猪II型圆环病毒Cap蛋白去核定位信号基因：以重组质粒pMD-PCV2为模版扩增Δ41ORF2片段，连接pMD-18T，转化DH5α感受态细胞，挑取阳性克隆进行PCR扩增，得到PCR产物；
2)构建重组质粒pYA-Δ41ORF2：将回收的Δ41ORF2基因的PCR产物用Sal I和Hind III双酶切，纯化回收后，连接用Sal I和Hind III双酶切的pYA3493载体，转化E.coli χ 6097感受态细胞，获得重组质粒pYA-Δ41ORF2；
3)构建重组菌株C501(pYA-Δ41ORF2)：将构建好的重组质粒pYA-Δ41ORF2，电转化至猪霍乱沙门氏菌Δasd C500缺失株感受态细胞，得到保藏编号为CCTCC M209314的重组猪霍乱沙门氏菌C501/pYA-Δ41ORF2。
3.一种二价基因工程疫苗，其特征是，将保藏编号为CCTCC NO：M209314的重组猪霍乱沙门氏菌C501/pYA-Δ41ORF2菌液制备成猪霍乱沙门氏菌和猪II型圆环病毒的二价基因工程疫苗。
4.权利要求1所述的重组猪霍乱沙门氏菌在制备猪霍乱沙门氏菌与猪II型圆环病毒二价基因工程疫苗中的应用。
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