[发明专利]甘蓝型油菜高油酸分子标记及制备方法与应用有效
申请号: | 200910273435.2 | 申请日: | 2009-12-28 |
公开(公告)号: | CN101824472A | 公开(公告)日: | 2010-09-08 |
发明(设计)人: | 周永明;傅廷栋;杨庆勇 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12P19/34;A01H1/04 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘蓝 油菜 油酸 分子 标记 制备 方法 应用 | ||
1.一种适用于高油酸甘蓝型油菜的选育的共显性SCAR分子标记,它的核苷酸序列如序列 表SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
2.用于扩增高油酸甘蓝型油菜共显性SCAR分子标记的引物对YQ-Fad2a-1和引物对 YQ-Fad2a-2,它的核苷酸序列如下所示:
引物对(1)YQ-Fad2a-1:
正向引物5′-CAGTTCACTCTCGGCAGC-3′,
反向引物5′-GCAACTCCTTGGACAGCA-3′;
引物对(2)YQ-Fad2a-2:
正向引物5′-CAGTTCACTCTCGGCTGG-3′,
反向引物5′-GATCAAAACTAAGAACCCG-3′。
3.一种高油酸甘蓝型油菜共显性SCAR分子标记的制备方法,按照以下步骤:
利用引物对HY-Fad2,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示,扩增高油 酸甘蓝型油菜品系甲A254和低油酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,得到两个DNA扩 增片段,然后对所述的DNA扩增片段进行克隆,测序,其中从高油酸甘蓝型油菜品系甲A254 中扩增得到如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,从低油酸甘蓝型油菜品系甲A177中扩增 得到如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列;在所述的SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的第 567-568bp处有一个4bp的插入突变,插入碱基为AGCC,导致序列特异扩增区域多态性; 根据SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列差异设计引物对YQ-Fad2a-1和引物 对YQ-Fad2a-2,进行PCR扩增,得到如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示核苷酸序列 的能够区分甘蓝型油菜高油酸与低油酸的共显性SCAR分子标记。
4.权利要求1所述的分子标记在辅助选择高油酸甘蓝型油菜中的应用。
5.权利要求2所述的特异引物对YQ-Fad2a-1和引物对YQ-Fad2a-2在选育高油酸甘蓝型油 菜中的应用。
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