[发明专利]甘蓝型油菜高油酸分子标记及制备方法与应用有效

专利信息
申请号: 200910273435.2 申请日: 2009-12-28
公开(公告)号: CN101824472A 公开(公告)日: 2010-09-08
发明(设计)人: 周永明;傅廷栋;杨庆勇 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11;C12P19/34;A01H1/04
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 王敏锋
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 甘蓝 油菜 油酸 分子 标记 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种适用于高油酸甘蓝型油菜的选育的共显性SCAR分子标记,它的核苷酸序列如序列 表SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。

2.用于扩增高油酸甘蓝型油菜共显性SCAR分子标记的引物对YQ-Fad2a-1和引物对 YQ-Fad2a-2,它的核苷酸序列如下所示:

引物对(1)YQ-Fad2a-1:

正向引物5′-CAGTTCACTCTCGGCAGC-3′,

反向引物5′-GCAACTCCTTGGACAGCA-3′;

引物对(2)YQ-Fad2a-2:

正向引物5′-CAGTTCACTCTCGGCTGG-3′,

反向引物5′-GATCAAAACTAAGAACCCG-3′。

3.一种高油酸甘蓝型油菜共显性SCAR分子标记的制备方法,按照以下步骤:

利用引物对HY-Fad2,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示,扩增高油 酸甘蓝型油菜品系甲A254和低油酸甘蓝型油菜品系甲A177基因组DNA,得到两个DNA扩 增片段,然后对所述的DNA扩增片段进行克隆,测序,其中从高油酸甘蓝型油菜品系甲A254 中扩增得到如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,从低油酸甘蓝型油菜品系甲A177中扩增 得到如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列;在所述的SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的第 567-568bp处有一个4bp的插入突变,插入碱基为AGCC,导致序列特异扩增区域多态性; 根据SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列差异设计引物对YQ-Fad2a-1和引物 对YQ-Fad2a-2,进行PCR扩增,得到如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示核苷酸序列 的能够区分甘蓝型油菜高油酸与低油酸的共显性SCAR分子标记。

4.权利要求1所述的分子标记在辅助选择高油酸甘蓝型油菜中的应用。

5.权利要求2所述的特异引物对YQ-Fad2a-1和引物对YQ-Fad2a-2在选育高油酸甘蓝型油 菜中的应用。

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