[发明专利]包虫病抗原基因即egG1Y162抗原基因及其重组蛋白和应用

说明书

一、技术领域

本发明涉及抗原基因技术领域，是一种包虫病抗原基因即egG1Y162抗原基因及其重组蛋白和应用。

二、背景技术

包虫病(cystic echinococcosis；CE)又称棘球蚴病，是细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus；Eg)的幼虫棘球蚴寄生于人体及某些动物肝、肺等脏器所致的一种严重的人畜共患慢性寄生虫疾病。预防棘球蚴病的措施是控制传染源和切断传播途径。目前重组疫苗的研制虽然有了一定进展，但是还没有取得理想的效果。

日本学者Katoh[1，2]等在研究多房棘球蚴绦虫时，发现一些疫苗候选蛋白具有分泌功能和膜表面锚定作用，它们通常都具有位于氨基末端疏水的信号肽和羧基末端疏水的跨膜区域，并与寄生虫和宿主的相互作用有关。这些跨膜蛋白质有利于寄生虫穿透宿主的细胞膜侵入宿主的体内和调节宿主的免疫应答。因此，可以将这些分泌型蛋白质作为候选疫苗或用于诊断疾病并命名为EMY162抗原。EMY162由日本学者Katoh等，在2007年底发现的，同时发表了两篇相关文章：[1]Y.Katoh，H.Kouguchi，J.Matsumoto，et al.Characterization ofemY162 encoding an immunogenic protein cloned from an adult worm-specific cDNAlibrary of Echinococcus multilocularis[J].Biochim.Biophys.Acta.2007，1780(1)：1-6.(从多房棘球绦虫成虫的cDNA文库中克隆的emY162基因及编码免疫蛋白的特点)。[2]H.Kouguchi，J.Matsumoto，Y.Katoh，et al.The vaccinationpotential of EMY162 antigen against Echinococcus multilocularisinfection[J].Biochim.Biophys.Acta.2007，363(4)：915-920.(EMY162抗原成为预防多房棘球蚴感染疫苗可能性)。

从上述两篇相关文章可知Katoh等发现的emY162(在多房棘球绦虫Echinococcusmultilocularis；Em，中发现的一种抗原基因)重组抗原可以诱导大鼠产生74.3％的免疫保护作用，同时EMY162重组抗原在泡型包虫病患者血清中阳性率也明显高于em95，在多房棘球蚴绦虫的四个发育阶段(原头节，续绦期，幼虫，成虫)均有emY162抗原蛋白表达。用多房棘球蚴病犬的血清进行Western blots分析显示，该抗原产生很强的IgG免疫反应。现在已经证明emY162是分泌型蛋白质，能够刺激犬的免疫系统产生有效的免疫应答，因此emY162抗原被认为是理想的多房棘球蚴病的候选疫苗。

三、发明内容

本发明提供了一种从细粒棘球蚴中得到的包虫病抗原基因即egG1Y162抗原基因及其重组蛋白和应用，特别是在制备防治人或畜包虫病的疫苗或诊断试剂中的应用。

本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种从细粒棘球蚴中得到的包虫病抗原基因即egG1Y162抗原基因，其特征在于具有序列1的核苷酸序列。

下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或改进：

上述核苷酸序列两端设计一对引物，该引物的

上游引物(Primer)：5’-ccgaattcatggtacttcgattctgt-3’，

下游引物(Primer)：5’-ccagcttagtaagtaataggagccca-3’。

本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：上述的包虫病抗原基因即egG1Y162抗原基因的重组蛋白。

本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：上述的包虫病抗原基因即egG1Y162抗原基因在制备防治人或畜包虫病的疫苗或诊断试剂中的应用。

本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：上述的重组蛋白在制备防治人或畜包虫病的疫苗或诊断试剂中的应用。

本发明从细粒棘球蚴中得到的包虫病抗原基因即egG1Y162抗原基因及其重组蛋白，通过egG1Y162基因的克隆，转化，诱导表达，动物实验进一步表明egG1Y162重组蛋白疫苗对继发性细粒棘球蚴感染小鼠有保护作用，可以成为防治包虫病的候选基因疫苗，为开发实用性的疫苗发展提供一条新的途径。

四、附图说明