[发明专利]一种检测精子DNA碎片的方法及装置

权利要求书

1.一种检测精子DNA碎片的装置，其特征在于，它包括：

（1）包被固相：在载片或容器上包被有高熔点凝胶的固相；所述高熔点 凝胶的熔点为40～100℃;

（2）固封于密封管内的凝胶；其内的凝胶为低熔点凝胶，其熔点为25～60 ℃；

（3）变性液：用来使精子变性以产生单链DNA的酸性水溶液；

（4）溶解液：用来溶解去除精子核蛋白的含巯基试剂的三羟甲基氨基甲 烷缓冲液；

（5）用来指示反应后精子DNA碎片化状况的染色液;

所述凝胶是聚丙烯酰胺凝胶或聚乙烯醇型凝胶或琼脂或琼脂糖或琼脂糖 衍生物或葡聚糖凝胶或葡聚糖衍生物凝胶；

所述溶解液pH值为7.0～9.0，其组分包括：巯基试剂的浓度含量为 0.01～2.8摩尔/升、离子去垢剂的重量含量为0.05～1.5%，非离子去垢剂的体 积含量为0.01～3.5%；

所述巯基试剂是半胱氨酸、二硫赤藓糖醇、2-巯基乙醇、二硫苏糖醇、 谷胱甘肽、2,3-二巯基丙醇中的一种或几种的混合；

所述离子去垢剂是3-[(3-胆烷酰胺丙基)-二甲铵]-1-丙磺酸盐、3-[(3-胆烷 酰胺丙基)-二甲铵]-2-羟-1-丙磺酸盐、十二烷基肌氨酸钠、十二烷基硫酸钠、 溴化十六烷基吡啶、十六烷基三甲基溴化铵、Zwittergent中的一种或几种的 混合；

所述非离子去垢剂是Tween-20、Tween-60、Tween-80、Brij35、Brij56、 Brij58、TritonX-100、TritonX-114、NonidetP40中的一种或几种的混合。

2.根据权利要求1所述的检测精子DNA碎片的装置，其特征在于：

还包括用于提取高活力精子和调整精子浓度的培养液。

3.根据权利要求1所述的检测精子DNA碎片的装置，其特征在于：

所述包被固相用的包被液中含Tris或磷酸盐缓冲液，包被液的pH值为 7.0～9.0；

所述密封管是带盖的，低熔点凝胶水溶液的pH值为7.0～9.0。

4.根据权利要求1所述的检测精子DNA碎片的装置，其特征在于：

所述酸性水溶液是冰乙酸、乙酸、盐酸、硝酸、硫酸、磷酸中的一种或 几种的混合，其中，pH0.1～4.0，酸浓度为0.02～0.2摩尔/升。

5.根据权利要求1所述的检测精子DNA碎片的装置，其特征在于：

所述染色液选用荧光染色液,并配有荧光封固液，该封固液采用对苯二 氨重量含量为0.05～0.5%和甘油体积含量为5～50%的磷酸盐缓冲液，其pH为 7.5～9.0，该封固液中还含有适量的抑制细胞生长的防腐剂。