[发明专利]一种能产广谱抗生素的绿僵菌 GYYA0601菌株及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及一种能产广谱抗生素的戴氏绿僵菌菌株及其应用。

背景技术

动植物、微生物在生物进化的历史长河中，为适应或抵御外界不良环境，形成了结构和功能具有多样性特点的代谢产物。微生物代谢产物的多样性与生物活性的多样性是一般合成化合物不能比拟的，几乎所有药物筛选模型都能从微生物中筛选到生理活性物。自上世纪青霉素的发现与研制成功以来，人类已经从微生物代谢产物中发现了大量的医用或农用药物。但已研究检测的微生物却仅占微生物种类的3％左右。此外，在天然药源中，微生物具有种类多、代谢途径和代谢产物丰富、生产方式和药用方式多、轻道地、易实现工业化生产等植物药无法媲美的优势，因此，微生物是创新药物的天然宝库和有效途径。抗生素是微生物来源药物的主要组成部分之一。无论是医用抗生素还是农用抗生素，目前都无法回避一个问题，即，如何获得高效、广谱、低毒、安全的抗生素。对医用抗生素而言，还有一个更严重的耐药性问题。长期以来滥用抗生素带来的抗生素耐药性已可能威胁到人类生存发展。因此，新结构、新靶点、新作用机理、尤其是抗耐药性抗生素类药物的研究是全球医药业的重大课题。微生物作为创新药物的天然药源宝库，从中发现了数以千计的各种类型的抗生素，为人类社会的发展的创造了一个又一个奇迹。

而今所面临的新问题，除了利用化学修饰、基因工程等技术手段改造传统抗生素或生产菌外，更重要是从绝大多数未曾发现的微生物资源中寻找新的有益资源，尤其是极端环境微生物或特殊类型微生物。而虫草(虫生真菌)就是特殊类型微生物中的杰出代表之一，它与昆虫或其它节肢动物形成寄生或共生关系，是生态圈中物种生态平衡的自然调节者，或者说对有害昆虫是天然的生物农药。因此，很可能在某些种类的虫草中发掘结构新颖、作用方式特殊的新型农用或医用抗微生物抗生素。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种抑菌能力强、抗菌谱广的新的戴氏绿僵菌菌株，该绿僵菌能产广谱性抗生素，可以用于制备抗细菌、抗真菌医用或农用抗生素类药物。

本发明新的戴氏绿僵菌Metarhizium taii GYYA0601菌株CGMCC NO.2880。发明人在贵州省贵阳市羊艾茶场土壤中采集到一种虫草，利用多途径多批次和次生子囊孢子微循环产孢方法(参见梁宗琦.中国真菌志(第23卷)虫草属.北京：科学出版社，2007.)分离培养获得二十余株菌株，所采的虫草和分离获得的菌株经鉴定为戴氏虫草Cordyceps taii和戴氏绿僵菌Metarhizium taii。经抗生活性筛选，戴氏绿僵菌GYYA0601菌株抑菌能力强、抑菌谱广。GYYA0601菌株已于2009年1月16日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC，北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101)，保藏编号为CGMCC No.2880，分类命名为戴氏绿僵菌，拉丁文学名为Metarhizium taii。

上述戴氏绿僵菌Metarhizium taii GYYA0601菌株的生物学形态特征描述为：在PDA培养基上，28℃培养12天后，菌丝有隔无色至暗色，平展，菌落中央白色，外围产孢结构及分生孢子形成明显的8-10条墨绿色环带，分生孢子瓶梗(8.0-22.5μm×0.9-1.8μm)近柱形，具短尖，单生于气生菌丝或紧密地轮生于分生孢子梗或原瓶梗上，也可通过微循环产孢直接从次生子囊孢子上产生，分生孢子(3.9-13.1μm×2.4-3.2μm)多串生，柱状，中部稍缢缩，两端圆或一端稍细，未见双生孢子，由次生子囊孢子微循环产孢形成的分生孢子，其形状大小基本与无性繁殖的分生孢子相同。

本发明还提供了前述戴氏绿僵菌Metarhizium taii GYYA0601菌株用于发酵生产抗生素的用途。

本发明还提供了前述戴氏绿僵菌Metarhizium taii GYYA0601菌株的发酵方法：

(1)菌种活化：将纯菌种接种于斜面菌种培养基上；

(2)一级种子制备：挑取菌丝块到种子培养液中，26～28℃、转速150～180r/min培养3～4天；

(3)发酵：接种一级种子到发酵培养基中，26～28℃、转速150～180r/min培养7～9天，得发酵产物。

进一步的，上述发酵方法为：

(1)菌种活化：将纯菌种接种于斜面菌种培养基上；

(2)一级种子制备：挑取5～10mm²大小的菌丝块到100ml种子培养液中，26～28℃、转速150～180r/min培养3～4天；