[发明专利]检测人甲型流感病毒H1和/或H3亚型的引物及方法

权利要求书

1.一种检测人甲型流感病毒H1和/或H3亚型的引物，其特征在于，包含由SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：6所示的任一核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的检测人甲型流感病毒H1和/或H3亚型的引物，其特征在于，所述引物选自下述两组引物中的至少一组：

(1)用于扩增甲型流感病毒H1靶核酸序列的引物对：包括由SEQ ID NO：1所示核苷酸序列的至少15个连续核苷酸的核酸引物、由SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的至少15个连续核苷酸的核酸引物和由SEQ ID NO：3所示核苷酸序列的至少15个连续核苷酸的核酸引物；

(2)用于扩增甲型流感病毒H3靶核酸序列的引物对：包括由SEQ ID NO：4所示核苷酸序列的至少15个连续核苷酸的核酸引物、由SEQ ID NO：5所示核苷酸序列的至少15个连续核苷酸的核酸引物和由SEQ ID NO：6所示核苷酸序列的至少15个连续核苷酸的核酸引物。

3.根据权利要求2所述的检测人甲型流感病毒H1和/或H3亚型的引物，其特征在于，所述引物选自下述两组引物中的至少一组：

(1)用于扩增甲型流感病毒H1靶核酸序列的引物对：包括由SEQ ID NO：1所示核苷酸序列的核酸引物、由SEQ ID NO：2所示核苷酸序列的核酸引物和由SEQ ID NO：3所示核苷酸序列的核酸引物；

(2)用于扩增甲型流感病毒H3靶核酸序列的引物对：包括由SEQ ID NO：4所示核苷酸序列的核酸引物、由SEQ ID NO：5所示核苷酸序列的核酸引物和由SEQ ID NO：6所示核苷酸序列的核酸引物。

4.一种检测人甲型流感病毒H1和/或H3亚型的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取核酸样本；

(2)以步骤(1)提取的核酸为模板，用权利要求1至3任意一项所述的引物序列，PCR扩增病原体的靶核酸序列；

(3)对扩增产物进行序列测定，并分析结果。

5.根据权利要求4所述的检测人甲型流感病毒H1和/或H3亚型的方法，其特征在于，所述的PCR扩增的反应体系为

cDNA 100倍稀释液：2μl

10×Taq buffer：2μl

dNTP(25mM)：2μl

上游引物(10μM)：0.6μl

下游引物(10μM)：0.6μl

Taq聚合酶(5U/μ1)：0.3μl

H2O：12.5μl。

6.根据权利要求4所述的检测人甲型流感病毒H1和/或H3亚型的方法，其特征在于，所述的PCR扩增的反应条件为：94℃预变性5分钟；94℃ 30秒、58℃ 30秒、72℃ 30秒重复反应35～40个循环；最后72℃延伸5分钟。