[发明专利]一种动物干扰素的制备方法无效
申请号: | 200910303630.5 | 申请日: | 2009-06-25 |
公开(公告)号: | CN102154418A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 王文彪;王丽莉 | 申请(专利权)人: | 天津艾森生物工程有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02 |
代理公司: | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人: | 闫俊芬 |
地址: | 301609 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 动物 干扰素 制备 方法 | ||
1.一种动物干扰素的制备方法,其特征在于具体实施步骤如下:
(1)无菌采取实验鸡脾脏,用脾脏制备淋巴细胞悬液,加入10μg/ml卡那霉素,用配置好的培养液稀释淋巴细胞悬液,使鸡脾淋巴细胞浓度稀释为每ml含105-1×107;
(2)对淋巴细胞单层进行传代培养;
(3)鸡脾淋巴细胞中加入少量干扰素,使其最终浓度为100-1000IU/ml,于37℃水浴培养0.5-2小时;
(4)再加入黄芪多糖,于37℃水浴培养1-2小时;
(5)然后在上述鸡脾淋巴细胞悬液中再加入适量干扰素诱生剂仙台病毒,使其最终浓度为128-1280血凝单位/ml,37℃条件下旋转培养18-24小时;
(6)待干扰素达到高峰值时,离心收集上清,加入盐酸调至pH 2.0,40℃,放置1-4天,灭活病毒,再加NaOH调至pH 7.0,即得粗制动物干扰素;
2.根据权利要求书1所述的一种动物干扰素的制备方法,其特征是:诱导鸡脾淋巴细胞产生干扰素的黄芪多糖质量浓度为25-100μg/ml。
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