[发明专利]一种寡糖分子疫苗的制备方法无效
申请号: | 200910304328.1 | 申请日: | 2009-07-14 |
公开(公告)号: | CN101596313A | 公开(公告)日: | 2009-12-09 |
发明(设计)人: | 陈德胜 | 申请(专利权)人: | 李子定 |
主分类号: | A61K39/02 | 分类号: | A61K39/02;A61P31/04;C12P19/00;C12R1/63;C12R1/42;C12R1/185;C12R1/38;C12R1/36;C12R1/37;C12R1/01 |
代理公司: | 广州市深研专利事务所 | 代理人: | 陈雅平 |
地址: | 518049深圳市福*** | 国省代码: | 广东;44 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 寡糖 分子 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种寡糖分子疫苗的制备方法,包括以下步骤:
(1)大规模细菌培养
将单一个纯的菌落自固体培养基上转种于适当量的液体培养基中,再将其逐级转种至各种大体积的液体培养基中,在适当的温度与时间进行培养;
(2)收集细菌细胞
用低温高速离心将细菌从悬液中沉淀下来;
(3)破裂细菌细胞
将细菌沉淀物,用EDTA将细胞破解,使胞浆内容物与胞壁分离;
(4)提取细菌细胞壁脂多糖
首先用热水将苯酚结晶配成一定浓度,并将胞壁溶液稀释,与等量苯酚溶液
混合;隔水加热,间隔旋转震荡;然后置于冷环境中两小时,使水相与酚相分离,分别收集水相与酚相脂多糖粗制品;
(5)回收菌细胞壁脂多糖
两相脂多糖粗制品分别装在分子量2000道尔顿的透析袋内,先经流动自来水透析,然后,再将之置于蒸馏水透析,其间不断更换蒸馏水,透析后的脂多糖粗制品浓缩回收;
(6)去蛋白与核酸
剩余的少量蛋白质、核酸、脱氧核糖核酸,经蛋白酶、核酸酶、脱氧核糖核酸酶将之消化;经反复低温超速离心,可使脂多糖的蛋白与核酸含减少至最低程度;
(7)去除类脂A
用强酸、强碱溶液交替加热处理以及使用电化学方法使类脂A分子去除;
(8)提取具有免疫原的寡糖分子
用现代分子生物学和免疫化学的方法,从多糖中分离出具有特异性高、抗原性强的寡糖分子,再将其回收、浓缩、真空冷冻干燥。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于李子定,未经李子定许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/200910304328.1/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。