[发明专利]安全、高效食用菌主培养基料的制作方法

权利要求书

1.一种安全、高效食用菌主培养基料的制作方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)选备料

选取洁净、干燥的原料，将原料粉碎处理完后装入发酵装置，然后加入原料重量40-60％的自来水，搅拌均匀；

(2)生物酶解高分子物质

将制备好的复合粗酶液，按上述原料重量10％的用量加入装有原料的发酵装置中，并搅拌均匀，45℃保温酶解8-12hrs，经检测其粗纤维、木质素含量在15-20％即可；

(3)生物降解农药残留

经第(2)步骤生物酶解完毕后，向发酵装置中充入蒸汽，当料温升至100℃时，保温45-60mins，后冷凝至35℃，再按原料重量10％加入已制备好的降解农药残留复合菌种，在30-35℃保温发酵36-48hrs，期间间歇补入无菌氧，使DO≥4.5，并不断搅拌，其转速为：120-160转/min；

(4)干燥得成品

将经过第(3)步骤发酵好的料液取出，置于干燥设施中于80℃温度下，通风干燥至含水量低于13％，经检测合格后即得成品。

2.根据权利要求1所述的安全、高效食用菌主培养基料的制作方法，其特征在于所述的复合粗酶液的制备包括以下步骤：

(1)菌种

制备复合粗酶液选用的菌种为：黄孢原毛平革菌和褐色丝膜菌、糙皮侧耳，其比例为1∶1∶1；

(2)制种用培养基：PDB液体培养基，即PDA培养基去掉琼脂粉成份；

(3)发酵用固体培养基

a、培养基组成

30％棉子壳、30％棉杆、6％谷壳、15％稻草、18.8％麸皮、0.1％酵母膏和0.1％的硫酸铵

b、培养基配置

将棉杆、稻草粉碎至2cm左右，再按比例称取除酵母膏和硫酸铵以外的各成份混合均匀后膨化处理，将膨化后的原料加入其重量50％的自来水，其中醇母膏和硫酸铵成份溶解在水中，搅匀，蒸煮60分钟；

(4)发酵用菌种制作

a、一级摇瓶种子培养

取各菌种的试管斜面种，按比例挑取1-2环，接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中装灭菌PDB液100ml，35℃，摇床培养5-7天；

b、二级摇瓶种子培养

5L三角瓶装1L培养液，灭菌冷却后按10％种量接入一级摇瓶种子35℃摇床培养3天；

c、种子罐种子培养

50升种子罐，装35升PDB培养液，灭菌冷却后按10％种量接入二级摇瓶种子35℃下，通气、搅拌，其中通气量为1∶0.3，搅拌转速为160-180转/分，培养48小时。

d、发酵培养

500L发酵装置装PDB培养液350L，灭菌冷却后，按10％种量接入种子罐种子。35℃下通气、搅拌培养48小时即得固体发酵用菌种，其中通气量为1∶0.3，搅拌转速为160-180转/分；

(5)固体发酵制备复合酶

按(3)配好的固体培养基冷却至35℃后，按10％种量接入已制备的发酵用菌种，35℃下培养8-12hrs，期间搅拌，转速120-160转/分，后升温至38-40℃下，静置培养120-140hrs。

(6)复合粗酶液提取

发酵完成后，向发酵装置中注入无菌去离子水，其量与发酵料比为1.5∶1，搅拌提取2-3hrs，静置，取清液即得复合粗酶液；其中复合粗酶液中经测定其成分及其组成为：木质素酶≥50％、纤维素酶≥25％、半纤维素酶≥20％，果胶酶≥3％；其中木质素酶酶活力单位≥1500u/L。