[发明专利]裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法

权利要求书

1.一种裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，纯化猪链球菌2型烈性噬菌体，提取噬菌体的DNA；

步骤二，以步骤一所得DNA为模板，PCR扩增裂解酶基因；

步骤三，原核表达步骤二扩增所得DNA，得到融合蛋白；

步骤四，纯化融合蛋白，复性，得到裂解酶。

2.根据权利要求1所述的裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法，其特征是，步骤三中，所述原核表达采用的质粒是pET-28a(+)。

3.根据权利要求1所述的裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法，其特征是，步骤四中，所述裂解酶的使用条件具体为：在裂解酶的反应体系中加入β巯基乙醇，使得β-巯基乙醇的最终的体积分数为0.8％。

4.根据权利要求1所述的裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法，其特征是，步骤四中，所述裂解酶的使用条件具体为：在裂解酶的反应体系中加入半胱氨酸，使得半胱氨酸的最终浓度为10mM。

5.根据权利要求1所述的裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法，其特征是，步骤四中，所述裂解酶使用的缓冲液为pH为5.2醋酸钠缓冲液。

6.根据权利要求1所述的裂解多种血清型猪链球菌的裂解酶的制备方法，其特征是，步骤四中，所述裂解酶的作用温度为37℃。