[实用新型]嗜水气单胞菌的Dot-ELISA检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及生物技术领域，具体地说是一种嗜水气单胞菌的Dot-ELISA检测试剂盒。

背景技术

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)属于弧菌科气单胞菌属，是一类广泛存在于水环境的病原菌，也是危害鱼类、两栖类、爬行类和哺乳类动物的致病菌。目前，国内外已有一些研究者对嗜水气单胞菌的检测做过研究，并相继开展了免疫荧光技术、选择性培养基鉴别培养法、葡萄球菌A蛋白协同凝集试验、单克隆抗体技术、凝集法、聚合酶链反应、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。

斑点酶联免疫吸附实验(Dot-ELISA)是上世纪80年代初发展起来的一项免疫学新技术。它与ELISA相似，只是将固相载体变为硝酸纤维素膜(NC膜)。Dot-ELISA方法的优点在于快速、简便，既保留了常规ELISA的优点，又克服了其繁琐的程序，且结果直观可用肉眼直接观察。这种方法不仅较其它方法快速准确，而且可大幅度降低检验成本，减少劳动强度，省时省料。但是现有Dot-ELISA所用的设备不易操作、成本高、劳动较复杂、无法在非实验室环境下进行、难以快速检测、难以有效应用于野外现场环境。

发明内容

本实用新型的目的是针对上述情况，提供了一种嗜水气单胞菌的Dot-ELISA检测试剂盒，用以解决该致病菌无法现场检测的难题。

本实用新型的技术方案是这样实现的：所述的嗜水气单胞菌的Dot-ELISA检测试剂盒，包括盒体和衬垫，在衬垫上设有放置硝酸纤维素膜的方格及存放不同溶液不同颜色瓶帽的试剂瓶瓶位，所述的试剂瓶瓶位分别为浓缩PBST液瓶位、PBS缓冲液瓶位、兔抗嗜水气单胞菌抗血清标准液瓶位、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位、牛血清白蛋白瓶位、DAB显色液瓶位、嗜水气单胞菌标准菌液瓶位；在盒体盒盖的内侧设有放置培养皿的口袋。

浓缩PBST液瓶位内放置有50ml带白色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，PBS缓冲液瓶位内放置有50ml蓝色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，兔抗嗜水气单胞菌抗血清标准液瓶位内放置有2ml红色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位内放置有1ml绿色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，牛血清白蛋白瓶位内放置有紫色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，DAB显色液瓶位内放置有黑色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，嗜水气单胞菌标准菌液瓶位内放置有黄色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶。

本实用新型的有益效果：灵敏高，可检出的最低检测限为1.0×10⁴cfu，可一次性进行多个样本的测定，减少检测样本所需要的时间，所需的试剂用不同大小、不同颜色的试剂瓶封装在盒内，易于快速区分，具有成本节约、操作简便易行、可在非实验室条件进行、便于携带和运输等优势，能快速、简便、灵敏地用于水产动物致病菌嗜水气单胞菌的检测。

附图说明

图1是本实用新型的结构示意图。

图中：1-盒体，2-衬垫，3-方格，4-浓缩PBST液瓶位，5-PBS缓冲液瓶位，6-兔抗嗜水气单胞菌抗血清标准液瓶位，7-辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位，8-牛血清白蛋白瓶位，9-DAB显色液瓶位，10-嗜水气单胞菌标准菌液瓶位，11-培养皿，12-口袋。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型作进一步说明。图1中，所述的嗜水气单胞菌的Dot-ELISA检测试剂盒，包括盒体1和衬垫2，其特征在于：在衬垫2上设有放置硝酸纤维素膜的方格3及存放不同溶液不同颜色瓶帽的试剂瓶瓶位，所述的试剂瓶瓶位分别为浓缩PBST液瓶位4、PBS缓冲液瓶位5、兔抗嗜水气单胞菌抗血清标准液瓶位6、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位7、牛血清白蛋白瓶位8、DAB显色液瓶位9、嗜水气单胞菌标准菌液瓶位10；在盒体1盒盖的内侧设有放置培养皿11的口袋12。

浓缩PBST液瓶位4内放置有50ml带白色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，PBS缓冲液瓶位5内放置有50ml蓝色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，兔抗嗜水气单胞菌抗血清标准液瓶位6内放置有2ml红色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位7内放置有1ml绿色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，牛血清白蛋白瓶位8内放置有紫色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，DAB显色液瓶位9内放置有黑色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，嗜水气单胞菌标准菌液瓶位10内放置有黄色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶。

用试剂盒内的试剂配制如下溶液：

配制PBST缓冲液∶用去离子水将浓缩PBST液按1∶19体积比进行稀释；