[实用新型]一种酪蛋白快速检测卡无效

专利信息
申请号: 200920235097.9 申请日: 2009-08-04
公开(公告)号: CN201497743U 公开(公告)日: 2010-06-02
发明(设计)人: 周坚 申请(专利权)人: 无锡安迪生物工程有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/558;G01N1/28
代理公司: 无锡市大为专利商标事务所 32104 代理人: 时旭丹;刘品超
地址: 214174 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 蛋白 快速 检测
【说明书】:

技术领域

本实用新型涉及一种酪蛋白快速检测卡,是一种检测酪蛋白的检测器具,属于奶制品检测技术领域。

背景技术

牛奶是人们日常生活重要的食品,牛奶营养丰富,是人类重要的食品,其主要成份有:每100克牛奶含水分87克、蛋白质3.3克、脂肪4克、碳水化合物5克、钙120毫克、磷93毫克、铁0.2毫克、维生素A 140国际单位、维生素B1 0.04毫克、维生素B2 0.13毫克、尼克酸0.2毫克、维生素C 1毫克。而牛奶蛋白质更是牛奶中的关键营养成分,鲜牛奶包装上都会标明蛋白质含量。正常情况下,牛乳所含有的蛋白总量大约为3.3%,其中2.5%左右是酪蛋白,0.6%是乳清蛋白。酪蛋白是一类磷酸蛋白,占牛乳真蛋白的80%左右。

收购生鲜牛奶、生产过程中、产品出厂时和市场上,都需检测蛋白质的含量,以判定牛奶的质量。根据蛋白质的化学性质,有几种蛋白检测方法。食品工业上普遍采用的被定为国家标准的是凯氏定氮法。这是19世纪后期丹麦人约翰.凯达尔发明的方法,原理很简单:蛋白质含有氮元素,用强酸处理样品,让蛋白质中的氮元素释放出来,测定氮的含量,就可以算出蛋白质的含量。牛奶蛋白质的含氮率约16%,根据国家标准,把测出的氮含量乘以6.38,就是蛋白质含量。

但凯氏定氮法实际上测的不是蛋白质含量,而是通过测氮含量来间接推算蛋白质的含量,如果样品中还有其他化合物含有氮,这个方法的准确性就存在问题。在通常情况下,牛奶中的主要成分只有蛋白质含有氮,其他主要成分(碳水化合物、脂肪)都不含氮,因此凯氏定氮法是一种很准确的测定蛋白质含量的方法。但是如果有人往样品中添加含氮的其他物质,通过凯氏定氮法将错误,就获得虚假的蛋白质含量。

为此,本实用新型拟发明一种基于蛋白质抗原性的免疫学检测方法,采取免疫学竞争法的原理,结合胶体金标记技术和免疫层析法设计的一种快速检测试剂,可快速特异地检测牛奶样品中的酪蛋白。根据检测卡样品测试线(T)和对照线(C)的有无来判定牛奶样品中的酪蛋白含量。反应是利用牛奶蛋白抗原性而建立的一种蛋白检测方法,具有特异性强的优点,可避免其它检测方法的假阳性导致的误检问题。同时检测卡操作简单快速,无需特殊的仪器设备,既可以在实验室进行,也可在超市、家庭、车间等实地进行测定。由于样本量需要少、简便快速,适用于大量样本的筛查。结果准确,液态奶样品灵敏度为2500ppm,准确率大于95%。

发明内容

本实用新型的目的在于提供一种能检测酪蛋白的检测器具,直接应用免疫学的方法直接检测液态奶、奶粉和奶制品样品酪蛋白的含量,克服现有凯氏定氮法非特异性检测的缺陷,建立基于免疫学特异性的检测方法。

本实用新型的技术方案:一种酪蛋白快速检测卡,其为在长条扁平薄壳状的检测卡外壳1中设置测试条2,检测卡外壳表面有检测窗孔3和加样孔4;测试条2是由支承背板5上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫8、胶体金膜7、硝酸纤维素膜6、和吸水膜9所组成;支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6,支承背板一端叠置粘贴吸水膜9,另一端叠置粘贴样品垫8,吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接,在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部,两者之间夹置粘贴一段胶体金膜7;胶体金膜为含抗酪蛋白抗体胶体金标记的玻璃纤维膜,硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带,依次是:含酪蛋白的检测带10,含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带11,测试条置入检测卡外壳内,样品垫正对加样孔,硝酸纤维素膜正对检测窗孔。

采用上述酪蛋白快速检测卡,检测样品可以是液态奶、奶粉和奶制品等样品。

样品的处理方法是:

针对液态奶样品的处理方法是:液态奶用样品稀释液进行10倍稀释后用于检测。

针对奶粉样品的处理方法是:称取1克奶粉样品,加入9mL样品稀释液,在试管中搅拌均匀,再用样品稀释液进行10倍稀释后用于检测。

针对奶制品样品的处理方法是:取1g捣碎后的奶制品样品,加入9mL样品稀释液,在试管中搅拌均匀,再用样品稀释液进行10倍稀释后用于检测。

所用样品稀释液为pH 7.6、10mmol PBST溶液。

当检测带10和质控带11同时显现棕红色印迹带,检测结果为阳性,表示被检测样品中酪蛋白含量低于正常值;

当检测带10不显示颜色,只有质控带11显现棕红色印迹,检测结果为阴性,表示被检测样品中酪蛋白含量正常;

当检测带10和质控带11均不显色,则表明测试条已失效。

所述正常值为样品中酪蛋白含量不低于质量浓度2.5%。

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