[实用新型]用于检测水体中微囊藻毒素的胶体金试纸

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测试纸条，特别是一种用于检测微囊藻毒素的试纸条。

背景技术

目前检测水样中微囊藻毒素的方法一般为化学分析法、生物分析法和免疫学方法主要包括酶联免疫吸附法。

化学分析法包括反相高效液相色谱(HPLC)与二极管阵列检测器(DAD)或电化学检测器联用、HPLC-UV(紫外检测器)、高效液相色谱一质谱(HPLC-MS)、气相色谱和质谱(GC-MS)联用、毛细管电泳(CE)、薄层色谱(TLC)等方法。利用不同物质在色谱柱中的分离速度进行分离，从而得到不同的色谱峰，根据保留时间和峰高或峰面积进行计算浓度。其不足有：HPLC和HPLC-MS联用技术是对不同类型的MCs进行定性分析和定量检测最为经典的技术，测定水样时需要专业人员经过复杂的预处理，比较耗时，该方法使用的仪器技术含量高，需要进行专业培训后才能掌握操作技术，且仪器精度要求高，价格昂贵，同时还必须备有标准毒素或某毒素在相同实验条件下的保留值。并且由于采集水样的塑料容器中某些塑料添加剂可干扰HPLC对MC-LRMC-YR的检测。使用生物分析法一般无法准确定量，且灵敏度较低，工作量较大，无法确定MCs的毒素类型和异构体。

免疫学方法主要包括酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)、蛋白磷酸酶抑制法和胶体金免疫层析法。ELISA使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。再与某种酶连接成酶标抗原或抗体。酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。蛋白磷酸酶抑制分析(PPIA)利用待测物质对荧光物质蛋白磷酸酶1(PP1)和蛋白磷酸酶2A(PP2A)的抑制效应进行定量分析。其不足有：免疫学方法干扰因素多，不能很好的鉴别毒素，会出现假阳性反应，常常需要HPLC等化学分析方法的进一步确认。

发明内容

本实用新型的目的就是提供一种用于检测水体中微囊藻毒素的胶体金试纸条，它可以对水中的MC-LR、MC-RR和MC-YR三种微囊藻毒素进行简单准确的检测辨认。

本实用新型的目的是通过这样的技术方案实现的，它包括有背衬板、加样纸、第一膜、第二膜和吸水纸，在背衬板表面上设置有第二膜，在第二膜的一端和背村板表面上设置有第一膜，在第二膜的另一端和背衬板表面上设置有吸水纸，第一膜的表面上设置有一层免疫胶体金，在第一膜和背衬板表面上设置有加样纸，在第二膜的表面上，设置有含有微囊藻毒素抗原的检测层和含有二抗的质控层。

使用时，在加样纸上加入水样，水样浸至第一膜，与第一膜上的免疫胶体金接触，免疫胶体金溶解在水样中。胶体金中了抗体称为免疫胶体金。

若被检水样中含有与检测层的抗原相对应的微囊藻毒素抗原，由于免疫胶体金含有抗体，水样中的微囊藻毒素与免疫胶体金中的抗体充分反应，使含有免疫胶体金的水样中微囊藻毒素抗体的抗原结合位点饱和，水样通过虹吸作用泳动至检测层，由于水样中微囊藻毒素抗体抗原结合位点饱和，所以不与检测层中的微囊藻毒素抗原反应，水样中的有颜色的免疫胶体金不会被截留，检测层不显色，水样继续泳动至质控层，免疫胶体金与质控层中的二抗结合，免疫胶体金被截留，质控层显色，反之质控层不显色则证明免疫胶体金失去活力，检测无效，多余的水样继续泳动至吸水纸，被吸水纸所吸收；

若水样中含有少量与检测层的抗原相对应的微囊藻毒素抗原，由于免疫胶体金含有抗体，水样中的少量微囊藻毒素与免疫胶体金中的部分抗体反应，含有免疫胶体金的水样中还有未被结合完的抗体，水样通过虹吸作用泳动至检测层，水样中的抗体与检测层中的微囊藻毒素抗原反应，水样中有颜色的免疫胶体金部分被截留，检测层显色很淡，水样继续泳动至质控层，免疫胶体金与质控层中的二抗结合，免疫胶体金被截留，质控层显色，反之质控层不显色则证明免疫胶体金失去活力，检测无效，多余的水样继续泳动至吸水纸，被吸水纸所吸收；