[发明专利]生物靶标的免疫磁性捕获和成像有效
申请号: | 200980104507.9 | 申请日: | 2009-01-07 |
公开(公告)号: | CN101939648A | 公开(公告)日: | 2011-01-05 |
发明(设计)人: | 布鲁斯·伯纳德;库尔特·霍法克;楚克·柯林斯 | 申请(专利权)人: | 卢米耐克斯公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/569;G01N33/58;G01N15/00 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 顾晋伟;田旸 |
地址: | 美国得*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 靶标 免疫 磁性 捕获 成像 | ||
1.用于固定和检测样品中的细胞的方法,其包括:
(a)将样品与磁性抗体相接触,所述磁性抗体针对可能存在于所述样品中的第一细胞上的特定表位具有特异性亲和力;
(b)将所述样品与第一标记抗体相接触,所述第一标记抗体针对所述细胞上的特定表位具有特异性亲和力;
(c)将所述样品的等分试样引入腔室中;
(d)向所述腔室施加磁场以吸引所述磁性抗体至所述腔室的表面;
(e)清洗所述腔室,以除去所述样品中未固定于所述腔室表面上的部分;
(f)对通过与所述磁性抗体结合而被固定在所述腔室表面上并通过与所述经标记抗体结合而被标记的细胞进行检测和计数;
(g)确定是否有统计学显著数目的经标记细胞固定于所述腔室的表面上;
(h)重复步骤(c)至(g),直至统计学显著数目的经标记细胞固定于所述腔室的表面上;以及
(i)对经固定且经标记的细胞进行检测和计数。
2.权利要求1的方法,其中所述样品是体液。
3.权利要求1的方法,其中所述样品是环境样品。
4.权利要求1的方法,其中所述细胞是淋巴细胞、白细胞或单核细胞。
5.权利要求1的方法,其中所述细胞是细菌细胞、孢子或真菌细胞。
6.权利要求1的方法,其中所述磁性抗体和经标记抗体针对同一表位具有特异性亲和力。
7.权利要求1的方法,其中所述磁性抗体和经标记抗体针对不同表位具有特异性亲和力。
8.权利要求1的方法,其中在将所述样品引入腔室之前使所述样品与所述经标记抗体相接触。
9.权利要求1的方法,其中在将所述样品引入腔室之后使所述样品与所述经标记抗体相接触。
10.权利要求1的方法,其中所述经标记抗体是经荧光标记的抗体。
11.权利要求1的方法,其还包括将所检出的细胞数与所述样品中的细胞数建立关联。
12.权利要求1的方法,其还包括使所述样品与第二经标记抗体相接触,所述第二经标记抗体针对所述细胞上的特定表位具有特异性亲和力,其中所述第二经标记抗体用不同于所述第一经标记抗体上标记物的标记物进行标记。
13.权利要求12的方法,其中所述第一经标记抗体和所述第二经标记抗体针对存在于不同细胞群上的不同表位具有特异性亲和力。
14.权利要求1的方法,其还包括:
将样品与多种不同的磁性抗体相接触,所述多种不同磁性抗体针对可能存在于所述样品中的多种不同细胞上的特定表位具有特异性亲和力;以及
将所述样品与多种不同的经标记抗体相接触,所述多种不同经标记抗体针对所述多种不同细胞上的特定表位具有特异性亲和力。
15.用于固定和检测样品中的一种或多种细胞群和/或亚群的方法,其包括:
(a)将样品与磁性抗体相接触,所述磁性抗体针对可能存在于所述样品中的细胞群上的特定表位具有特异性亲和力;
(b)将所述样品与第一经标记抗体相接触,所述第一经标记抗体针对所述细胞群上的特定表位具有特异性亲和力;
(c)将所述样品与第二经标记抗体相接触,所述第二经标记抗体针对所述细胞群中第一细胞亚群上的特定表位具有特异性亲和力;
(d)将所述样品与第三经标记抗体相接触,所述第三经标记抗体针对所述细胞群中第二细胞亚群上的特定表位具有特异性亲和力;
(e)将所述样品的等分试样引入腔室中;
(f)向所述腔室施加磁场以吸引所述磁性抗体至腔室表面;
(g)清洗所述腔室,以除去所述样品中未固定于所述腔室表面上的部分;
(h)对通过与所述磁性抗体结合而被固定在所述腔室表面上并通过与所述第一经标记抗体结合而被标记的细胞进行检测和计数;
(i)确定是否有统计学显著数目的经标记细胞固定于所述腔室表面上;
(j)重复步骤(e)至(i),直至统计学显著数目的经标记细胞固定于所述腔室的表面上;
(k)对分别标记有所述第一、第二和第三经标记抗体的经固定细胞进行检测和计数。
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