[发明专利]抗ADAM-15抗体及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及特异性地识别ADAM-15(去整合素金属蛋白酶：ADisintegrinAnd Metalloprotease)的抗体以及该抗体的片段(以下，总称为“抗体等”)、编码该抗体等的DNA、含有该DNA的重组载体、用该载体转化的细胞、产生前述抗体等的细胞、前述抗体等的制造方法、含有前述抗体等的药物组合物、含有前述抗体等的诊断药。另外，本发明涉及特异性地识别人ADAM-15的单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体(改型抗体)以及人源抗体(全人源性抗体)；产生前述单克隆抗体的杂交瘤细胞；前述单克隆抗体的制造方法；前述杂交瘤细胞的制造方法；含有前述抗体的治疗药；含有前述抗体的诊断药等。

背景技术

ADAM是含有富含半胱氨酸残基的去整合素结构域和金属蛋白酶样结构域的分子，作为功能性蛋白质不仅有金属蛋白酶活性还能发挥粘附分子活性，因此，受到人们的关注。多数ADAM具有跨膜域，局部存在于细胞膜，对于细胞表面的分子控制起到极为重要的作用。ADAM蛋白质家族现在已鉴定出30种以上，其膜外部具有细胞粘附、细胞融合、蛋白质分解、细胞内信号传导的功能，因此，参与受精、神经发生、成肌细胞融合、细胞因子或其他膜蛋白质的膜外部的切断。尤其是，ADAM蛋白质家族是与蛇毒解离素结构相似的膜锚定(membrane-anchor)蛋白质，因此，关系到与细胞间和细胞-基质相互作用有关的各种生物学上的过程(例如，受精、成肌细胞发生以及神经发生等)。至此，关于新型的ADAM分子的探索及其功能阐明及其控制方法，从制药上的观点考虑，进行了深入的研究。

例如：有认为ADAM-1和ADAM-2通过卵子的整合素的介入，参与卵子和精子的受精(参照非专利文献1)。有指出ADAM-10参与Notch信号的控制，在神经形成中起到重要的作用，以及，还在膜蛋白的加工过程中参与细胞外基质成分的分解(参照非专利文献2)。最近，报告了1种被认为是软骨细胞外基质聚蛋白多糖(aggrecan)的分解酶的聚蛋白多糖酶(aggrecanase)得到纯化、克隆，其为ADAM家族的分子(参照非专利文献3)。因而，期待开发出通过控制ADAM-10的酶活性治疗关节炎、变形性关节症的药物。ADAM-13在非洲爪蟾中，在发生期表达，认为对其形态的形成具有重要作用(参照非专利文献4)。现在，还没有来自哺乳动物的ADAM-13的报告。ADAM-17作为肿瘤坏死因子(TNF)的转化酶(可溶性TNF的合成酶)已为人所知。目前正致力于研究ADAM-17的抑制剂作为由TNF的异常亢进所引起的疾病(炎症、发热、循环系统异常、移植物抗宿主反应、自身免疫疾病等)的预防和/或治疗药。关于ADAM-17本身及ADAM-17的抑制剂的筛选方法已经公开(参照专利文献1、专利文献2)。

ADAM-15是分子量约90kDa的跨膜型糖蛋白质，属于ADAM蛋白质家族。已知ADAM-15具备作为通过其去整合素域参与细胞与细胞粘附的粘附分子的功能(参照非专利文献5)。在有20种以上的ADAM蛋白质家族之中，仅人ADAM-15在去整合素区域中具有RGD三肽序列，显示出重组型人ADAM-15和整合素αvβ3的特异的相互作用取决于RGD序列。另外，ADAM-15有可能与整合素(αvβ3、α5β1、αⅡβ3、α9β1)相互作用，已指出与细胞-细胞间的粘附有关。另外，包括去整合素域的RGD序列的第481号至第492号氨基酸序列(RPTRGDCDLPEF)(环序列)中的R481、C487、D488、L489、P490、E491和/或F492被丙氨酸取代的ADAM-15，与α9β1整合素的相互作用能力降低。因此，显示出ADAM-15中的R481、C487、D488、L489、P490、E491和/或F492对于ADAM-15与α9β1整合素的相互作用是必要的(参照非专利文献6)。

当以基因重组ADAM-15去整合素结构域进行给药时，乳癌细胞的增殖受到抑制，因此，认为ADAM-15与整合素的相互作用与癌细胞的增殖有关(参照非专利文献7)。

另外，ADAM-15也被认为与细胞迁移有关。例如，有人报道了在过量表达ADAM-15的NIH3T3细胞中，迁移降低(参照非专利文献8)。另外，有人报道了当在Jurkat细胞中过量表达ADAM-15时，细胞凝聚增加(参照非专利文献9)。此外，有人报道了ADAM-15与作为细胞粘附分子的VE钙粘蛋白在局部共同存在(参照非专利文献10)。根据这些信息，认为ADAM-15对于细胞间粘附来说具有重要的作用。