[发明专利]微量滴定板

说明书

技术领域

本发明涉及阱间的光学串扰减小的微量滴定板。本发明还涉及用于在使用光发射或光透射的分析方法中使用的这种微量滴定板。

背景技术

许多生物技术分析方法都利用通常称为微量滴定板的多阱试样板。每个阱中进行单独的反应，并且反应的最终产物被用于解释分析的结果。或者，反应可被实时追踪。

这种分析方法可以在溶液中进行，即，所有的反应物都存在于溶液中。如果存在所要被检测的被分析物，则反应物就会提供某种信号，诸如外观或颜色上的变化、发光、浑浊等等。一个示例是Pyrosequencing分析法，它涉及在将核苷酸加入核酸链之后检测酶级联体系发出的光。该分析方法还可以对阱的固相执行，例如在所谓的夹心试验中，将对被分析物有亲和性的分子键合在阱的底部，添加可能含有被分析物的试样，添加对被分析物有亲和性的标记分子，洗去多余的标记，并且可在添加显影剂(developing agent)之后检测任何剩余的标记。

要被在诸如上述的方法中检测的信号可以包括来自阱的光发射或是通过阱的光透射。通常依靠各种光检测手段来自动检测这种位于阱底部下面的光。所以，微量滴定板有透明的底部，以使得能够可以在从上面分配反应物的同时，从下面实时地对光进行检测。如果要测量阱的内容物的颜色或浑浊，那么光可以从板上方的光源发出来。

制造这种板的最方便、最经济的方法是由透明材料片通过例如真空成型或注射成型来生产板。因此，整个板都是透明的。但是，这种透明塑料能够把光从一个阱导向另一个阱。这种现象是光的内反射和透射导致的，并且结果导致来自不应产生光信号的阱的错误的信号。这样的结果是错误的结果。因此，应避免这种反射和透射。

WO 94/21379公开一种构造，其中阱壁在内侧和/或外侧涂布了诸如金属、陶瓷或半导体等的反射材料。或者，板由反射材料制成，或将透明的微量滴定板放置在反射板内部。但是，这些构造的制造较昂贵。而且当使用这种涂布技术时，存在涂布到阱的底表面的风险。此外，对内侧的涂布可能会影响阱内的想要的生物/化学处理。所述文献还记载了使用颜料来对塑料染色，从而减少透射率或反射率也是已知的。如果需要透明的底部，则这些解决方案将增加制造成本，因为需要用两种不同材料形成板。

US 6,051,191提供一种微量滴定板，其利用包含两种不同的聚合物的构造来减少串扰。阱由透明聚合物制成，该透明聚合物置于不透明聚合物的基质中。不透明聚合物覆盖了阱的壁的外侧以及所述阱之间的顶部表面，从而留下具有透明底部和不透明壁的阱。虽然此微量滴定板减少了阱间的串扰，但是它还需要复杂的多步生产工艺，这造成生产成本高昂。

上述微量滴定板都可用于基于光的分析方法。但是，仍存在着对于容易制造、便宜且在用于基于光检测或测量的分析方法时仍能减少光的透射和/或反射的微量滴定板的需要。

发明内容

本发明的目的是提供一种方便实时测量且光学串扰减少的微量滴定板(microtitre plate)构造。微量滴定板的制造成本应足够低，以使其可用完即弃。

本发明的第一个方面，提供了一种微量滴定板，包括具有透明底部的阱，其中所述的微量滴定板在至少二个相邻的阱之间具有至少一个物理形变。该物理形变可具有沟道、突脊、孔、狭缝或者台阶的形状。

在进一步的实施方式中，相邻阱之间的每个表面都具有至少一个物理形变。

在进一步的实施方式中，物理形变可以以任何几何图案围绕阱。这可以以例如网格、或圆、或方块的形式实现。

根据本发明的微量滴定板适用于测量发光或透光的分析方法，诸如化学发光、生物发光、测光法(photometry)和/或荧光。

本发明提供一种微量滴定板，其包括具有透明底部的阱，其允许实时测量，包括在测量期间同时添加反应物。通过阱间的物理形变实现了串扰的减少。该微量滴定板可以通过常规处理技术一体成形，这意味着简单的制造工艺和低的生产成本。

附图说明

图1显示了现有技术中已知的一种微量滴定板，(a)是俯视图，(b)是截面图。虚线箭头表示阱的分布。

图2显示了根据本发明的微量滴定板的截面图，其具有不同的物理形变，和形变的不同组合。

图3显示了根据本发明的微量滴定板的截面图，包括具有孔或狭缝、或者孔或狭缝与突脊组合的构造。虚线表示孔或狭缝。

图4显示了根据本发明的微量滴定板的俯视图，包括围绕阱的物理形变。阴影的区域表示物理形变。

图5显示了根据实施例1的两个微量滴定板。板1在阱间具有沟道，而板2没有。

图6显示了根据实施例2的微量滴定板。