[发明专利]使用EGFL8拮抗剂抑制血管发生的方法

说明书

对相关申请的交叉引用

本申请要求2008年1月14日提交的美国临时申请No.61/020,960的权益，通过述及将其公开内容完整收入本文。

发明领域

一般而言，本发明涉及对于与血管发生有关的状况和疾病的治疗有用的组合物和方法。具体而言，本发明涉及EGF样结构域8(EGFL8)的拮抗剂。

发明背景

现在完全确立了血管发生对多种病症的发病机理有重要贡献。这些包括实体瘤和转移、动脉粥样硬化、晶状体后纤维组织增生、血管瘤、慢性炎症、眼内新血管疾病诸如增殖性视网膜病例如糖尿病性视网膜病、视网膜静脉闭塞(RVO)、年龄相关黄斑变性(AMD)、新血管性青光眼、移植角膜组织和其它组织的免疫排斥、类风湿性关节炎、和银屑病。Duda et al.，J.Clin.Oncology 25(26)：4033-42(2007)；Kesisis et al.，Curr.Pharm.Des.13：2795-809(2007)；Zhang and Ma，Prog.Ret.&Eye Res.26：1-37(2007)。

在肿瘤生长的情况中，血管发生让肿瘤细胞获得了与正常细胞相比的生长优势和增殖自治。肿瘤通常开始于单个异常细胞，由于与可利用毛细管床的距离，该细胞只能够生长至几立方毫米的尺寸，而且它能在较长的一段时间里保持“休眠”状态而不进一步生长或传播。有些肿瘤细胞然后转向血管发生表型以激活内皮细胞(EC)，所述内皮细胞增殖并成熟成新的毛细血管。这些新形成的血管不仅让原发性肿瘤继续生长，而且让转移性肿瘤细胞传播并再建群(recolonization)。尚未完全了解控制血管发生转换的机制，但是认为肿瘤块的新血管形成源自众多血管发生刺激物与抑制物的净平衡。

迄今为止，多种分子，多为由周围细胞生成的分泌性因子，已显示出调节EC分化、增殖、迁移和接合成索样结构。例如，血管内皮生长因子(VEGF)已鉴定为涉及刺激血管发生和诱导血管通透性的关键因子。Ferrara et al.，Endocr.Rev.18：4-25(1997)。另外，一种ECM相关蛋白，称作表皮生长因子样7(EGFL7)已经显示为由内皮细胞表达且在血管发生中有作用。Parker et al.，Nature 428：754-58(2004)；Fitch et al.，Dev.Dynamics 230：316-24(2004)；Campagnolo et al.，Am.J Path.167(1)：275-284(2005)；Schmidt et al.，Development，134(16)：2913-23(2007)；美国专利申请US2007/0031437。Fitch 等人还记载了Egfl7的一种种内同源基因(paralog)，称作Egfl8，并指出了它的表达与Egfl7的相似，但是EGFL7和EGFL8在功能上可能不交叠。

尽管血管发生领域取得了许多进展，仍然需要鉴定靶物和开发能补充或增强现有抗血管发生疗法的疗效的手段。

发明概述

本发明至少部分基于下述发现，即EGF样结构域8(EGFL8)涉及血管发生。因而，本发明提供用于抑制具有血管发生成分的病理性过程的新组合物及其用途。

一方面，本发明提供一种在具有与血管发生有关的病理性状况的受试者中降低或抑制血管发生的方法，包括对该受试者施用EGFL8拮抗剂。在一些实施方案中，所述EGFL8拮抗剂是抗EGFL8抗体。在一些实施方案中，所述病理性状况是新生物，例如癌。在一些实施方案中，所述方法进一步包括化疗剂。在一些实施方案中，所述病理性状况与眼有关。在一些实施方案中，所述病理性状况是眼内新血管疾病。

在一些实施方案中，所述方法进一步包括对所述受试者施用第二抗血管发生剂。在一些实施方案中，所述第二抗血管发生剂在所述EGFL8拮抗剂的施用之前或之后施用。在一些实施方案中，所述第二抗血管发生剂与所述EGFL8拮抗剂同时施用。在一些实施方案中，所述第二抗血管发生剂是EGFL7的拮抗剂或血管内皮细胞生长因子(VEGF)的拮抗剂，例如抗EGFL7抗体或抗VEGF抗体(例如贝伐单抗(bevacizumab))。

附图简述

图1A和图1B显示E10.5小鼠胚胎颅脉管系统中的Egfl7和Egfl8表达样式。

图2显示被采用来生成Egfl8敲除小鼠的策略。

图3显示Egfl7+/-、Egfl8-/-和Egfl7-/-、Egfl8-/-小鼠的视网膜中的血管表型。

图4显示Egfl8敲除小鼠中的角膜微袋血管发生表型。