[发明专利]抗PcrV抗体

说明书

技术领域

本发明涉及识别PcrV的单克隆抗体或其一部分。具体而言，本发明涉及中和活性(以下，也称作细胞毒抑制活性)较以往的抗PcrV抗体高的抗体或其一部分、以及含有该抗体或其一部分的药物组合物。

背景技术

绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)是自然界中广泛存在的专性需氧性革兰氏阴性杆菌。其病原性通常低，但却是引起在患有癌症或糖尿病等各种基础疾病的患者、给予具有免疫抑制作用的药物的患者中多发的机会性感染症的病原菌，往往会引起肺炎、尿路感染、败血症等，带来严重后果。绿脓杆菌感染症在临床现场中被认为是目前最难治疗的感染症之一。其原因在于：绿脓杆菌不仅对现有抗生素的感受性本来就低，而且对各种抗生素容易产生耐药性，难以治疗的倾向强。因此，对于绿脓杆菌，在开发新的抗生素的对策方面存在局限，人们迫切希望开发不依赖于抗生素的疗法。

绿脓杆菌的强细胞毒性是通过经由III型外毒素分泌系统将毒素注入真核细胞内而发挥出来的。PcrV是包含294个残基(NCBI检索号AAC45935、SEQ ID NO：1)的III型外毒素分泌系统的构成蛋白，编码该蛋白的操纵子序列已公开(专利文献1、非专利文献1)。对PcrV的控制可能与绿脓杆菌感染症的治疗方法有关(非专利文献2)，因此有人报道了具有中和活性的抗PcrV多克隆抗体(非专利文献3、4)和单克隆抗体(专利文献2、非专利文献5、6)。但多克隆抗体难以人源化，而且难以改善抗原性，难以用作药物组合物。此外，迄今为止所报道的单克隆抗体，其中和活性低，还不能满足临床现场的要求。

专利文献1：美国专利6551795

专利文献2：日本特表2005-500250

非专利文献1：Yahr，T.L.等人，J.Bacteriol.1997年，第179卷，7165页

非专利文献2：T.Sawa等人，Nature Medicine，1999年，第5卷，392页

非专利文献3：Shime N等人，J.Immunol.2001年，第167卷，5880页

非专利文献4：Imamura Y等人，Eur.Respir.J.2007年，第29卷，965页

非专利文献5：Karine Faure等人，J.Immune.Based.Therapies andVaccines，2003年，第1卷

非专利文献6：Dara W.Frank等人，J.Infect.Disease，2002年，第186卷，64页

发明内容

发明所要解决的课题

本发明所要解决的课题在于：提供对感染症、特别是绿脓杆菌引起的感染症的治疗有效的方法。

解决课题的方法

本发明人等就抗PcrV单克隆抗体的制作进行了深入研究，结果成功地制作了认为与以往已知的抗PcrV单克隆抗体相比对疾病的疗效更高的新型单克隆抗体，从而完成了本发明。

即，本发明涉及下述(1)～(10)。

(1).抗PcrV单克隆抗体或其一部分，所述抗PcrV单克隆抗体具有选自以下(A)～(C)的至少一种性质：

(A)在体外以1nM～200nM的浓度抑制50％以上的绿脓杆菌对白细胞的细胞毒性；

(B)在体外以1nM～50nM的浓度抑制50％以上的绿脓杆菌对骨髓瘤细胞的细胞毒性；以及

(C)与PcrV的解离常数(Kd)为2×10^-9(M)以下。

(2).单克隆抗体或其一部分，所述单克隆抗体具有由下述杂交瘤的至少一种产生的单克隆抗体的所有互补性决定区(CDR)的氨基酸序列：以保藏号FERM P-21403保藏的杂交瘤、以保藏号FERM P-21404保藏的杂交瘤、以保藏号FERM P-21405保藏的杂交瘤或以保藏号FERM P-21406保藏的杂交瘤。

(3).单克隆抗体或其一部分，所述单克隆抗体由下述杂交瘤的至少一种产生：以保藏号FERM P-21403保藏的杂交瘤、以保藏号FERMP-21404保藏的杂交瘤、以保藏号FERM P-21405保藏的杂交瘤或保藏号FERM P-21406保藏的杂交瘤。

(4).抗PcrV单克隆抗体或其一部分，所述抗PcrV单克隆抗体在SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的136位～233位具有其表位。

(5).抗PcrV单克隆抗体或其一部分，所述抗PcrV单克隆抗体具有下述的重链可变区和轻链可变区：