[发明专利]表达血凝素之转基因植物中生产的重组流感病毒样颗粒(VLP)

权利要求书

1.核酸，其包含与在植物中有活性之调控区有效连接的编码流感血凝素(HA)的核苷酸序列。

2.权利要求1的核酸，其中所述HA包含天然或非天然的信号肽。

3.权利要求2的核酸，其中所述非天然的信号肽是蛋白质二硫键异构酶信号肽。

4.权利要求1的核酸，其中所述HA是A型流感病毒、B型流感或者是A型流感的亚型，其选自H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15和H16。

5.权利要求1的核酸，其中所述HA来自A型流感，选自H1、H2、H3、H5、H6、H7和H9。

6.在植物中生产流感病毒样颗粒(VLP)的方法，其包括：

a)将权利要求1的核酸导入所述植物或植物部分中，以及

b)在允许所述核酸表达的条件下培养所述植物或植物部分，从而生产VLP。

7.权利要求6的方法，其中在所述导入步骤(步骤a)中，所述核酸在该植物中瞬时表达。

8.权利要求6的方法，其中在所述导入步骤(步骤a)中，所述核酸在该植物中稳定表达。

9.权利要求6的方法，其还包括以下步骤：

c)收获所述宿主并纯化所述VLP。

10.权利要求6的方法，其中在所述导入步骤(步骤a)中，包含编码一种或多种伴侣蛋白之核苷酸序列的第二核酸被导入所述植物中。

11.权利要求10的方法，其中所述一种或多种伴侣蛋白选自Hsp40和Hsp70。

12.在植物中生产流感病毒样颗粒(VLP)的方法，其包括：

a)提供包含权利要求1之核酸的植物或植物部分，以及

b)在允许所述核酸表达的条件下培养所述植物或植物部分，从而生产所述VLP。

13.包含权利要求1之核酸的植物。

14.权利要求13的植物，其还包含含有与在植物中有活性之调控区有效连接的编码一种或多种伴侣蛋白的核苷酸序列的核酸。

15.权利要求14的植物，其中所述一种或多种伴侣蛋白选自Hsp40和Hsp70。

16.病毒样颗粒(VLP)，其包含流感病毒血凝素(HA)蛋白以及一种或多种源自植物的脂质。

17.权利要求16的病毒样颗粒(VLP)，其中所述HA是A型流感、B型流感或者是A型流感的亚型，其选自H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15和H16。

18.权利要求17的VLP，其中所述HA来自A型流感，其选自H1、H2、H3、H5、H6、H7和H9。

19.组合物，其包含有效剂量的权利要求16之VLP以及可药用载体。

20.诱导对象中针对流感病毒感染之免疫的方法，其包括施用权利要求16的病毒样颗粒。

21.权利要求20的方法，其中所述病毒样颗粒经口、皮内、鼻内、肌内、腹膜内、静脉内或皮下施用给对象。

22.病毒样颗粒(VLP)，其包含具有植物特异性N-聚糖或经修饰N-聚糖的流感病毒HA。

23.权利要求22的病毒样颗粒(VLP)，其中所述HA是A型流感、B型流感或者是A型流感的亚型，其选自H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9、H10、H11、H12、H13、H14、H15和H16。

24.权利要求23的VLP，其中所述HA来自A型流感，其选自H1、H2、H3、H5、H6、H7和H9。

25.组合物，其包含有效剂量的权利要求22之VLP以及可药用载体。

26.诱导对象中针对流感病毒感染之免疫的方法，其包括施用权利要求25的组合物。

27.权利要求26的方法，其中所述组合物经口、皮内、鼻内、肌内、腹膜内、静脉内或皮下施用给对象。