[发明专利]新型嵌合α-淀粉酶变体

权利要求书

1.长度约为480-515个氨基酸残基的嵌合多肽，所述嵌合多肽具有(a)包含AmyL淀粉酶N端部分的约180个或更多连续的氨基酸残基的氨基端结构域，以及(b)包含AmyS淀粉酶的羧基端部分的羧基端结构域；只要所述嵌合多肽不是野生型AmyL淀粉酶或AmyS淀粉酶，其中所述嵌合多肽具有相对于至少AmyS淀粉酶提高的热稳定性。

2.根据权利要求1的嵌合多肽，其在氨基端结构域中包含相对于AmyL淀粉酶的至少一个取代的氨基酸残基，使得提供增加所述多肽热稳定性的稳定化结构的至少一部分。

3.根据权利要求2的嵌合多肽，其中稳定化结构是至少部分由取代的氨基酸残基形成的盐桥。

4.根据权利要求2的嵌合多肽，其中所述取代的氨基酸残基对应于AmyL或AmyS淀粉酶的187位或188位或其两者。

5.根据权利要求4的嵌合多肽，其中嵌合多肽中Asp残基和Thr残基取代AmyL淀粉酶中的两个连续Ser残基。

6.根据权利要求1的嵌合多肽，其中AmyL淀粉酶具有SEQ IDNO：1的氨基酸序列。

7.根据权利要求1的嵌合多肽，其中AmyS淀粉酶具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

8.根据权利要求1的嵌合多肽，其与SEQ ID NO：1-17中的任意序列具有约95％的序列同一性，只要该嵌合多肽不是SEQ ID NO：1或2。

9.根据权利要求8的嵌合多肽，其中嵌合多肽中Asp残基和Thr残基取代AmyL淀粉酶中187位的两个连续Ser残基。

10.根据权利要求1中的嵌合多肽，其包含在95℃下孵育30分钟后，保留其至少50％活性的α-淀粉酶的催化活性。

11.根据权利要求10的嵌合多肽，其在95℃下孵育60分钟后，保留其至少60％的催化活性。

12.根据权利要求11的嵌合多肽，其在95℃下孵育60分钟后，保留其至少80％的催化活性。

13.根据权利要求1的嵌合多肽，其包含比活大于AmyL淀粉酶的α-淀粉酶的催化活性。

14.热稳定嵌合α-淀粉酶，其包含N端部分和C端部分；所述N端部分包含来自AmyL淀粉酶N端部分的连续氨基酸序列，所述C端部分包含来自AmyS淀粉酶C端部分的连续氨基酸序列；其中所述嵌合α-淀粉酶具有大于AmyL淀粉酶的比活以及高于AmyS淀粉酶的95℃下的热稳定性，并且其具有长度约为475-520个残基的一级氨基酸序列。

15.根据权利要求14的嵌合淀粉酶，在用于淀粉浆的液化过程中时，具有相当液化过程中AmyS淀粉酶的大约相当淀粉浆峰值粘度，并且与相当液化过程中的AmyL淀粉酶一样地降低淀粉浆的最终粘度。

16.根据权利要求15的嵌合淀粉酶，其在95℃下孵育30分钟后，保留其至少50％的比活。

17.根据权利要求16的嵌合淀粉酶，其在95℃下孵育60分钟后，保留其至少80％的比活。

18.根据权利要求15的嵌合淀粉酶，其中AmyL淀粉酶具有SEQ IDNO：1的序列，AmyS淀粉酶具有SEQ ID NO：2的序列。

19.根据权利要求17的嵌合淀粉酶，其与SEQ ID NO：1-17中的任意序列具有至少约95％的序列同一性，只要所述嵌合淀粉酶不是SEQ ID NO：1或2。

20.根据权利要求19的嵌合淀粉酶，其相对于AmyL淀粉酶在N端结构域中还包含至少一个取代的氨基酸残基，使得提供增强所述多肽热稳定性的稳定化结构的至少一部分。

21.根据权利要求20的嵌合多肽，其中稳定化结构是至少部分由取代的氨基酸残基形成的盐桥。

22.根据权利要求21的嵌合多肽，其中取代的氨基酸残基对应于AmyL或AmyS淀粉酶中的187位或188位或其两者。

23.根据权利要求22的嵌合多肽，其中嵌合多肽中Asp残基和Thr残基取代AmyL淀粉酶中的两个连续Ser残基。