[发明专利]通过固相合成制备的肽的纯化无效
申请号: | 200980116943.8 | 申请日: | 2009-05-15 |
公开(公告)号: | CN102027005A | 公开(公告)日: | 2011-04-20 |
发明(设计)人: | C·科恩贝克;T·B·汉森 | 申请(专利权)人: | 诺沃-诺迪斯克有限公司 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K1/04;C07K14/00;C07K14/605 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李志东;刘健 |
地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 丹麦;DK |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 相合 制备 纯化 | ||
1.一种用于纯化通过固相肽合成制备的肽的方法,其包括使通过固相肽合成制备的肽的粗提取物与固体载体接触的步骤。
2.根据权利要求1的方法,其中所述固相肽合成包括使用Fmoc作为氨基末端保护基团。
3.根据权利要求1或2的方法,其中所述方法包括用于从所述粗肽提取物中去除二苯富烯的方法。
4.根据权利要求1-3中任一项的方法,其中所述固体载体包括包含热塑性聚合物的包装材料。
5.根据权利要求4的方法,其中所述固体载体选自容器、粒状物、颗粒物和漏斗架。
6.根据权利要求4或5的方法,其中所述热塑性聚合物是聚乙烯或聚丙烯。
7.根据权利要求4-6中任一项的方法,其包括下述步骤:
(a)将得自固相合成的所述粗肽提取物加入所述包装材料中;
(b)使所述提取物在所述包装材料中温育;
(c)从所述包装材料中取出所述提取物;和
(d)对所述提取物实施标准肽分离。
8.根据权利要求7的方法,其中在步骤(d)中的所述标准肽分离是离子交换层析。
9.根据权利要求1-3中任一项的方法,其中所述固体载体包括离子交换层析柱。
10.根据权利要求1-3中任一项的方法,其中所述固体载体包括阴离子交换层析柱。
11.根据权利要求9或10中任一项的方法,其包括下述步骤:
(a)在标准层析条件下,用得自固相合成的所述粗肽提取物或得自权利要求7的方法中步骤(a)-(c)的肽装载所述离子交换层析柱;
(b)用醇执行第一个洗脱步骤;和
(c)用一种或更多种缓冲剂执行第二个洗脱步骤。
12.根据权利要求11的方法,其中在步骤(c)中使用的缓冲剂包括Tris(三(羟甲基)甲胺)、TAPS(3-{[三(羟甲基)甲基]氨基}丙磺酸、Bicine(N,N-二(2-羟乙基)甘氨酸)、Tricine(N-三(羟甲基)甲基甘氨酸)、HEPES(4-2-羟乙基-1-哌嗪乙磺酸)、TES(2-{[三(羟甲基)甲基]氨基}乙磺酸、MOPS(3-(N-吗啉代)丙磺酸、PIPES(哌嗪-N,N′-双(2-乙磺酸))、Cacodylate(二甲基胂酸盐)、MES(2-(N-吗啉代)乙磺酸)或乙酸盐。
13.根据权利要求11或12中任一项的方法,其中在步骤(b)中使用的所述醇是C1-5醇。
14.根据任何前述权利要求的方法,其中所述多肽是胰高血糖素样肽。
15.一种肽,其通过权利要求1-14中任一项中描述的方法获得。
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