[发明专利]利用细胞治疗心脏组织的组合物和方法

权利要求书

1.一种组合物，所述组合物包含TGFβ-1、BMP4、α-凝血酶、选自由心营养素和IL-6组成的组的化合物、以及选自由Cardiogenol C和视黄酸组成的组的化合物。

2.如权利要求1所述的组合物，所述组合物包含TGFβ-1、BMP4、α-凝血酶、心营养素和Cardiogenol C。

3.如权利要求1所述的组合物，所述组合物包含选自由FGF-2、IGF-1、活化素-A、TNF-α、FGF-4、LIF、VEGF-A及其组合组成的组的至少一种化合物。

4.如前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物包含FGF-2、IGF-1和活化素-A。

5.如前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物包含活化素-A、FGF-2、IL-6、IGF-1和视黄酸。

6.如权利要求1所述的组合物，所述组合物不包含选自由TNF-α、FGF-4、LIF和VEGF-A组成的组的至少一种化合物。

7.如权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中当一种化合物存在于所述组合物中时，其存在量为：所述TGFβ-1以1ng/ml至5ng/ml的量存在，所述BMP4以1ng/ml至10ng/ml的量存在，所述心营养素以0.5ng/ml至5ng/ml的量存在，所述α-凝血酶以0.5单位/ml至5单位/ml的量存在，所述Cardiogenol C以50nM至500nM的量存在，所述FGF-2以1ng/ml至10ng/ml的量存在，所述IGF-1以10ng/ml至100ng/ml的量存在，所述活化素-A以1ng/ml至50ng/ml的量存在，所述TNF-α以1ng/ml至50ng/ml的量存在，所述FGF-4以1ng/ml至20ng/ml的量存在，所述IL-6以10ng/ml至100ng/ml的量存在，所述LIF以1单位/ml至10单位/ml的量存在，所述VEGF-A以1ng/ml至50ng/ml的量存在，所述视黄酸以每ml中0.1μM至1.0μM的量存在。

8.如权利要求1所述的组合物，所述组合物包含以组合方式使用的重组TGFβ-1(2.5ng/ml)、BMP4(5ng/ml)、心营养素(1ng/ml)、Cardiogenol C(100μM)。

9.如权利要求8所述的组合物，所述组合物还包含α-凝血酶(1U/ml)、FGF-2(10ng/ml)、IGF-1(50ng/ml)和活化素-A(5ng/ml)。

10.如权利要求1所述的组合物，所述组合物包含以组合方式使用的重组TGFβ-1(2.5ng/ml)、BMP4(5ng/ml)、活化素-A(5ng/ml)、FGF-2(10ng/ml)、IL-6(100ng/ml)、因子IIa(hα-凝血酶、1U/ml)、IGF-1(50ng/ml)和视黄酸(1μM)。

11.如权利要求1至10中任一项所述的组合物，所述组合物包含在培养基中，所述培养基选自由含有胎牛血清、人血清、血小板裂解物及其混合物的培养基组成的组。

12.一种由初始细胞获得分化细胞的方法，所述分化细胞以提高水平表达选自由MEF2c mRNA、MESP-1 mRNA、Tbx-5 mRNA、GATA4mRNA、Flk-1 mRNA、GATA6 mRNA、Fog-1 mRNA及其组合组成的组的至少一种mRNA，和/或具有选自由Nkx2.5多肽、MEF2C多肽、Tbx-5多肽、FOG-2多肽、GATA-4多肽、MESP-1多肽及其组合组成的组的至少一种多肽，其中所述至少一种多肽与所述分化细胞的细胞核相关，其中所述方法包括在权利要求1至11中任一项的组合物的存在下培养初始细胞。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述分化细胞表达提高水平的MEF2c mRNA和MESP-1 mRNA。

14.如权利要求12和13中任一项所述的方法，其中所述初始细胞是间充质干细胞。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述间充质干细胞是骨髓来源的干细胞。