[发明专利]使用感兴趣的基因-报道物融合蛋白和光学成像的治疗送递和监测

权利要求书

1.非介入性监测细胞中感兴趣的基因的表达的方法，该方法至少包括以下步骤：

a)将核酸分子导入所述细胞中，所述核酸分子包含：

aa)启动子序列；

bb)与其操作性连接的编码所述感兴趣的基因多肽的序列；

cc)与其操作性融合的编码荧光报道多肽的序列；

b)通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

c)使所述细胞与影响所述感兴趣的基因的表达的化合物接触；

d)在步骤c)后通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

e)比较在步骤b)中检测到的荧光报道多肽水平与在步骤d)中检测到的荧光报道多肽水平；

f)基于步骤e)中的比较，给所述化合物诱导的所述感兴趣的基因的表达的改变赋值。

2.在体内非介入性监测细胞中感兴趣的基因的表达的根据权利要求1的方法，该方法至少包括以下步骤：

a)将核酸分子导入所述细胞中，所述核酸分子包含：

a.甲基化的启动子序列；

b.与其操作性连接的编码所述感兴趣的基因多肽的序列；

c.与其操作性融合的编码荧光报道多肽的序列；

b)通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

c)使所述细胞与脱甲基药物接触；

d)在步骤c)后通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

e)比较在步骤b)中检测到的荧光报道多肽水平与在步骤d)中检测到的荧光报道多肽水平；

f)基于步骤e)中的比较，给脱甲基药物诱导的所述感兴趣的基因的表达的增加赋值。

3.根据权利要求1的方法，该方法至少包括以下步骤：

a)将核酸分子导入人或动物体外的细胞中，所述核酸分子包含：

aa)甲基化的启动子序列；

bb)与其操作性连接的编码所述感兴趣的基因多肽的序列；

cc)与其操作性融合的编码荧光报道多肽的序列；

b)通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

c)使所述细胞与脱甲基药物接触；

d)在步骤c)后通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

e)比较在步骤b)中检测到的荧光报道多肽水平与在步骤d)中检测到的荧光报道多肽水平；

f)基于步骤e)中的比较，给脱甲基药物诱导的所述感兴趣的基因的表达的增加赋值。

4.在体内非介入性监测细胞中感兴趣的基因的表达的根据权利要求1的方法，该方法至少包括以下步骤：

a)将核酸分子导入所述细胞中，所述核酸分子包含：

aa)启动子序列；

bb)与其操作性连接的编码所述感兴趣的基因的非功能性多肽的序列；

cc)与其操作性融合的编码荧光报道多肽的序列；

b)通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

c)使所述细胞与针对所述感兴趣的基因定制的RNAi接触；

d)在步骤c)后通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

e)比较在步骤b)中检测到的荧光报道多肽水平与在步骤d)中检测到的荧光报道多肽水平；

f)基于步骤e)中的比较，给RNAi诱导的所述感兴趣的基因的表达的减少赋值。

5.根据权利要求1的方法，该方法至少包括以下步骤：

a)将核酸分子导入人或动物体外的细胞中，所述核酸分子包含：

a.启动子序列；

b.与其操作性连接的编码所述感兴趣的基因多肽的序列；

c.与其操作性融合的编码荧光报道多肽的序列；

b)通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

c)使所述细胞与针对所述感兴趣的基因定制的RNAi接触；

d)在步骤c)后通过非介入性光学成像方法检测所述细胞中的荧光报道多肽；

e)比较在步骤b)中检测到的荧光报道多肽水平与在步骤d)中检测到的荧光报道多肽水平；

f)基于步骤e)中的比较，给RNAi诱导的所述感兴趣的基因的表达的减少赋值。

6.根据权利要求1-5的任一项的方法，其中通过声致穿孔、局部注射或脂质体袋，或其混合辅助的转染将所述核酸分子和/或所述RNAi导入所述细胞，所述脂质体袋携带用于正确靶向、鉴定和定位的抗宿主细胞抗原的抗体。