[发明专利]用于产生己二酸和其他化合物的微生物

权利要求书

1.一种非天然存在的微生物生物体，包括具有己二酸途径的微生物生物体，所述己二酸途径包含以足以产生己二酸的量表达的至少一种编码己二酸途径酶的外源性核酸，所述己二酸途径包括琥珀酰-CoA：乙酰-CoA酰基转移酶；3-羟酰-CoA脱氢酶；3-羟基己二酰-CoA脱水酶；5-羧基-2-戊烯酰-CoA还原酶；和己二酰-CoA合成酶、磷酸己二酰转移酶/己二酸激酶、己二酰-CoA：乙酰-CoA转移酶或己二酰-CoA水解酶。

2.权利要求1所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述微生物生物体包含两种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

3.权利要求1所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述微生物生物体包含三种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

4.权利要求1所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述微生物生物体包含四种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

5.权利要求1所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述微生物生物体包含五种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

6.权利要求5所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述五种外源性核酸编码琥珀酰-CoA：乙酰-CoA酰基转移酶、3-羟酰-CoA脱氢酶、3-羟基己二酰-CoA脱水酶、5-羧基-2-戊烯酰-CoA还原酶和己二酰-CoA合成酶。

7.权利要求5所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述五种外源性核酸编码琥珀酰-CoA：乙酰-CoA酰基转移酶、3-羟酰-CoA脱氢酶、3-羟基己二酰-CoA脱水酶、5-羧基-2-戊烯酰-CoA还原酶和磷酸己二酰转移酶/己二酸激酶。

8.权利要求5所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述五种外源性核酸编码琥珀酰-CoA：乙酰-CoA酰基转移酶、3-羟酰-CoA脱氢酶、3-羟基己二酰-CoA脱水酶、5-羧基-2-戊烯酰-CoA还原酶和己二酰-CoA：乙酰-CoA转移酶。

9.权利要求5所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述五种外源性核酸编码琥珀酰-CoA：乙酰-CoA酰基转移酶、3-羟酰-CoA脱氢酶、3-羟基己二酰-CoA脱水酶、5-羧基-2-戊烯酰-CoA还原酶和己二酰-CoA水解酶。

10.权利要求1所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述至少一种外源性核酸是异源核酸。

11.权利要求1所述的非天然存在的微生物生物体，其中所述非天然存在的微生物生物体在基本上厌氧的培养基中。

12.一种产生己二酸的方法，包括在产生己二酸的条件下和足以产生己二酸的时间内培养具有己二酸途径的非天然存在的微生物生物体，所述途径包含以足以产生己二酸的量表达的至少一种编码己二酸途径酶的外源性核酸，所述己二酸途径包括琥珀酰-CoA：乙酰-CoA酰基转移酶；3-羟酰-CoA脱氢酶；3-羟基己二酰-CoA脱水酶；5-羧基-2-戊烯酰-CoA还原酶；和己二酰-CoA合成酶、磷酸己二酰转移酶/己二酸激酶、己二酰-CoA：乙酰-CoA转移酶或己二酰-CoA水解酶。

13.权利要求12所述的方法，其中所述非天然存在的微生物生物体在基本上厌氧的培养基中。

14.权利要求12所述的方法，其中所述微生物生物体包含两种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

15.权利要求12所述的方法，其中所述微生物生物体包含三种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

16.权利要求12所述的方法，其中所述微生物生物体包含四种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

17.权利要求12所述的方法，其中所述微生物生物体包含五种各自编码己二酸途径酶的外源性核酸。

18.权利要求17所述的方法，其中所述五种外源性核酸编码琥珀酰-CoA：乙酰-CoA酰基转移酶、3-羟酰-CoA脱氢酶、3-羟基己二酰-CoA脱水酶、5-羧基-2-戊烯酰-CoA还原酶和己二酰-CoA合成酶。