[发明专利]天花DNA疫苗及其引起免疫应答的抗原

权利要求书

1.一种能够在哺乳动物中产生抗痘病毒的保护性免疫应答的DNA疫苗，其包含多种质粒，所述质粒含有编码抗原的核酸序列，所述抗原组合是序列SEQ ID NO:2的A4L、SEQ IDNO:4的A27L、SEQ ID NO:6的B5R、SEQ ID NO:8的A33R、SEQ ID NO:10的A56R、SEQ ID NO:12的F9L、SEQ ID NO:14的H3L以及SEQ ID NO:16的L1R。

2.如权利要求1所述的DNA疫苗，其中所述抗原均由不同的DNA质粒表达。

3.如权利要求2所述的DNA疫苗，其中所述DNA质粒包含编码所述抗原的共有DNA序列。

4.如权利要求2和3中任一项所述的DNA疫苗，其中所述DNA疫苗包含多个不同的DNA质粒，所述质粒分别包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13以及SEQ ID NO:15的编码DNA序列。

5.如权利要求2和3中任一项所述的DNA疫苗，其中所述DNA疫苗包含多个不同的DNA质粒，所述质粒分别包含编码一种蛋白质的编码DNA序列，所述蛋白质的序列是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14以及SEQ ID NO:16。

6.如权利要求1所述的DNA疫苗，其中所述DNA质粒均以大于50μg的剂量存在。

7.如权利要求6所述的DNA疫苗，其中所述DNA质粒均以125μg的剂量存在。

8.如权利要求1所述的DNA疫苗，还包含佐剂，所述佐剂选自IL-8、IL-12、IL-15、IL-18、IL-28、MCP-1、MIP-l、MIP-1p、RANTES、RANK、RANK LIGAND、Ox40、Ox40LIGAND、CTACK、TECK或者MEC、或其组合。

9.如权利要求8所述的DNA疫苗，其中所述佐剂是IL-12、IL-15、IL-28或者RANTES。

10.如权利要求1所述的DNA疫苗，其中所述DNA疫苗能够在哺乳动物中产生抗天花病毒的保护性免疫应答。

11.含有编码SEQ ID NO:2的A4L、SEQ ID NO:4的A27L、SEQ ID NO:6的B5R、SEQ ID NO:8的A33R、SEQ ID NO:10的A56R、SEQ ID NO:12的F9L、SEQ ID NO:14的H3L以及SEQ ID NO:16的L1R的核酸序列的多种DNA质粒在制备DNA疫苗中的用途，所述疫苗用于在哺乳动物中诱导抗痘病毒的包括中和抗体应答在内的保护性免疫应答的方法，所述疫苗配制用于注射入所述哺乳动物的组织中。

12.如权利要求11所述的用途，其中所述疫苗配制用于皮内注射或者肌内注射。

13.如权利要求11和12中任一项所述的用途，所述疫苗通过注射和利用电穿孔量的电能对所述组织进行电穿孔的步骤来给予。

14.如权利要求13所述的用途，其中所述电穿孔步骤包括递送恒定电流至所述组织。

15.如权利要求14所述的用途，其中所述电穿孔步骤包括递送0.2A的电流。

16.如权利要求11所述的用途，其特征在于重复所述注射步骤。