[发明专利]滴定板，它的阅读器和检测分析物的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于检测分析物的滴定板和它的阅读器。本发明还涉及一种用于检测分析物的方法。此外本发明涉及这种方法的应用、滴定板的应用以及滴定板-阅读器的一种组合。

背景技术

借助分子诊断分析，例如确定HI病毒、丙肝和乙肝病毒的病毒性负荷。在中心实验室如今这种分析往往在滴管自动机设备上实施。作为反应容器使用小型滴定板，尤其包括例如8行每行12个凹穴的所谓96式板。这些凹穴按彼此标准化的间距约0.9cm排布。试样材料和试剂由滴管自动机可自由编程地借助用塑料或可清洗和可重新使用的尖端组成的滴管端，移液到滴定板预定的凹穴内或孔洞内。此外，在滴管自动机设备中还实施一些工作步骤，如在规定温度下培育、混合过程或例如磁力分离过程。

分子诊断的一种几乎不可缺少的方法是，通过热循环反应，例如所谓的聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaktion)，简称PCR，扩增一个所谓的靶物，亦即分析物。在此过程中，分析物分子最小的不能直接证实的量，指数般复制到可证实的量。

要扩增或已扩增试样的处理极为关键。例如通过气溶胶形成，有可能用甚至仅个别分子最小的污染物，便导致试样材料有错误的数量上正的或增大的结果。因此在分子诊断时通常在隔离的空间内实施试样的准备和扩增。然而这非常麻烦和需要实验室合作者处理试样。

一种解决途径在于如在DE102005059535A1中介绍的那样，在实施PCR前用薄膜密封地封闭滴定板。接着，滴定板应该在同一个空间内不再打开。所述采用隔离空间的措施，与使分析过程集成化和自动化的趋势对立。

为了分析形成的PCR产物连同扩增的分析物，例如考虑使用基于所谓的Real-Time-PCR的光学方法。不过有一些在分子诊断时进行电检测的测量方法，其中实施杂交反应。由WO99/07879A1已知此类方法。为此将形成的PCR产物从反应容器转移到用于杂交的另一个容器内。一种防污染地转移的方案在于，将用于PCR和杂交的容器密封地组合在一个封闭的盒内，例如在一个所谓Point of Care盒内。然而这种方案对于按常规的许多种用途往往太昂贵，而且只允许比较小的处理量。

为了有效检测，可以检测一种与扩增的分析物杂交反应的产物。例如在DE10233212A1中公开了作为举例提及的由DE10058397A1已知用于生物芯片的另一种装置。DE10126341A1说明了一种生物芯片，它通过与分析物杂交改变可电检测的特性。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种滴定板，它可以改进扩增试样的自动化操作。

上述技术问题问题采取按权利要求1所述简单的技术措施得以解决。

本发明尤其包括按权利要求1的滴定板第一种实施形式。

按本发明的滴定板优选地有一些凹穴，它们按间距布设，这一间距与标准小型滴定板中的间距一致，因此按本发明的滴定板可以由滴管自动机操作。所述标准间距例如为9mm。此外，滴定板优造地有标准滴定板的长度和宽度，它们例如优选地与有12×8个凹穴的标准滴定板规格一致。按本发明的滴定板的厚度优选地较大，目的是容有分别包围一个生物芯片和多个凹穴的壁，如下面还要更详细地说明的那样。

按本发明的滴定板优选地可通过滴管自动机操作，它有一个新滴管端的备用库。它可以抓取滴管端，移动到标准滴定板上凹穴的例如12×8＝96个位置中的任意一个处，滴管端在那里下沉以及从凹穴抽吸或注射液体。此外，它将已使用的滴管端存放在一个废料罐内，抓取一个新的干净的滴管端并用它继续工作。

为了检测分析物，按本发明在滴定板上设至少一个生物芯片。“生物芯片”理解为一个适用于检测分析物，例如某种DNA的芯片，以及尤其在存在分析物时产生一个电信号。典型地，生物芯片有一个或多个具有捕捉分子的传感面，捕捉分子总是专与分析物结合。可以在一个生物芯片上设多个有不同捕捉分子的传感面，例如8至400，特别优选地60或128个传感面或“Spots(斑点)”。生物芯片例如涉及一种有通用Zip-Code捕捉器的CMOS芯片。优选地，在滴定板上存在多个生物芯片，尤其6至24个，优选地12个生物芯片，所以可以实施例如12个随机存取多通道测定法(12Random Access Multiplex Assays)。