[发明专利]通过使用小分子调节剂诱导复能基因而重编程细胞

权利要求书

1.一种用于重编程细胞的方法，所述方法包括：将细胞暴露于诱导复能基因表达的小分子调节剂；并且筛选细胞，其中所述细胞已经恢复分化潜能。

2.如权利要求1所述的方法，其中筛选所述细胞包括：将所述细胞暴露于所述小分子调节剂之前和之后的表型相比较，并鉴定具有与恢复的分化潜能一致的表型的细胞。

3.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括：将所述筛选的细胞扩增为细胞群。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述小分子调节剂选自由以下组成的组：组蛋白脱乙酰酶抑制剂、甲基结合结构域蛋白抑制剂、甲基腺苷基转移酶抑制剂、DNA甲基转移酶抑制剂、组蛋白甲基转移酶抑制剂、赖氨酸甲基转移酶抑制剂、组蛋白脱甲基酶抑制剂和甲基循环酶抑制剂。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述小分子调节剂是DNA甲基转移酶抑制剂。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述DNA甲基转移酶抑制剂是RG108。

7.如权利要求1所述的方法，其中筛选所述细胞包括：使用针对由复能基因表达的蛋白的抗体或使用针对复能标记物的抗体来分离细胞。

8.如权利要求1所述的方法，其中筛选所述细胞包括：使用由复能基因驱动的报道分子或对选择标记物的抗性来分离细胞。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述复能基因选自由Oct-4、Sox-2和Nanog组成的组。

10.如权利要求1所述的方法，所述方法还包括：将所述细胞暴露于所述小分子调节剂之前复能基因的染色质结构与暴露于所述小分子调节剂之后获得的染色质结构相比较。

11.一种用于重编程细胞的方法，所述方法包括：将具有第一转录模式的细胞暴露于小分子调节剂，其中所述调节剂诱导复能基因的表达；将所述细胞的所述第一转录模式与暴露于所述调节剂之后获得的转录模式相比较；并且筛选细胞，其中所述细胞已经恢复分化潜能。

12.如权利要求11所述的方法，其中暴露于所述调节剂之后的所述转录模式至少50％类似于胚胎干细胞的转录模式。

13.如权利要求11所述的方法，其中比较所述转录模式之前，将所述细胞暴露于所述小分子调节剂之前和之后的表型相比较。

14.如权利要求11所述的方法，所述方法还包括：将所述筛选的细胞扩增为细胞群。

15.如权利要求11所述的方法，其中筛选所述细胞包括：使用针对由复能基因表达的蛋白的抗体或使用针对复能标记物的抗体来分离细胞。

16.如权利要求11所述的方法，其中所述复能基因选自由：Oct-4、Sox-2和Nanog组成的组。

17.一种富集的重编程的细胞群，所述重编程的细胞群根据包括以下步骤的方法产生：将细胞暴露于诱导复能基因表达的小分子调节剂；并且筛选细胞，其中所述细胞已经恢复分化潜能；并培养所述筛选的细胞至产生细胞群。

18.如权利要求17所述的富集的重编程的细胞群，其中所述重编程的细胞表达选自由以下组成的组的细胞表面标记物：SSEA3、SSEA4、Tra-1-60和Tra-1-81。

19.如权利要求17所述的富集的重编程的细胞群，其中所述复能基因选自由：Oct-4、Sox-2和Nanog组成的组。

20.如权利要求17所述的富集的重编程的细胞群，其中所述重编程的细胞占所述群的至少60％。