[发明专利]用于预防或治疗AIDS的组合物和方法

说明书

技术领域

本发明提供了用于在人类患者中预防或治疗获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的组合物和方法，以及对抗HIV感染的疫苗。

背景技术

自从HIV-1发现以来(Barre-Sinoussi等，1983)，搜寻对抗AIDS的疫苗一直是一个重大问题。经典的靶向HIV-1包膜蛋白的疫苗途径的失败，指出了使用另一种靶、例如被称为Tat的HIV-1转录蛋白的反式激活子的重要性，这是由于它的细胞外功能参与了摧毁对抗HIV感染细胞的免疫细胞性应答(Jeang等，1999)。

Tat主要以两种不同长度存在，86-87个残基或99-101个残基，它们显示出多方面的活性(Jeang等，1999)。由于存在非同义的单核苷酸多态性，在第二个外显子编码序列中产生了终止密码子，长的形式在除了亚型D之外所有HIV-1亚型的临床分离物中是主要的(Jeang等，1999)。Tat被分成六个区域(Kuppuswamy等，1989)，具有一个参与大多数Tat活性的所谓的基本区。生物活性Tat变体的NMR研究显示，基本区和其他功能区良好地暴露于溶剂，并包围由部分N-末端与非常保守的Trp 11构成的核心(Péloponèse等，2000；Gregoire等，2001；Watkins等，2008)。在不同的Tat变体间，这种折叠在水性溶液中是相似的，但是当暴露于疏水溶剂时可以急剧变化(Péloponèse等，1999)。Tat是柔性蛋白，并且结构性变化对于它与其药理学靶的结合是必需的(Loret等，1992)。

Tat主要在被感染细胞的核中发现，在那里它起到反式作用转录激活子(trans-acting transcriptional activator)的作用(Wong-Staal等，1985； Fujisawa等，1985)，在那里已知它通过复杂的过程参与启动转录和RNA链延伸(Cullen，1990)，所述过程涉及细胞蛋白与病毒mRNA上的茎-凸环前导RNA、——TAR(反式激活响应区)的相互作用和Tat的乙酰化(Bres等，2002)。研究显示，它也参与HIV-1 RNA的反转录(Harrich等，1997)。

尽管缺乏信号序列，但Tat是唯一被HIV-1感染的细胞分泌的HIV-1蛋白，并且以可检测的水平在HIV-1感染的细胞的培养物上清液(0.1-1ng/ml)(Ensoli等，1990；Westendorp等，1995b；Chang等，1997)和HIV-1感染的患者的血清(1-40ng/ml)(Xiao等，2000；Westendorp等，1995b)中发现。细胞外Tat表现出多方面的活性(Jeang等，1999)，但是最重要的是通过穿越细胞膜、经线粒体途径引起凋亡，来触发未感染的T细胞的凋亡(Chen等，2002，Campbell等，2004，de Mareuil等，2005)。在SHIV-1激惹的猕猴中细胞外Tat的体内中和引起CD8⁺T细胞的升高，并且HIV-1感染的CD4⁺T细胞变得检测不到(Watkins等，2006)。

因此，Tat在HIV-1发病机理中的作用不仅是作为HIV-1在被感染细胞中复制的必需蛋白，而且作为细胞外毒素(Gallo，1999)。因此，这与开发靶向Tat的疫苗是相关的(Goldstein，1996)。但是，具有针对Tat的抗体的血清反应阳性患者不能识别来自所有HIV-1亚型的Tat变体(Campbell等，2007b)。此外，这些抗体不能减缓疾病向AIDS的进展(Senkaali等，2008)。

显然，如以前提出的使用主要在欧洲和北美发现的B亚型Tat的Tat疫苗(Godstein，1996；Zagury等，1998；Cafaro等，1999)，只有低的可能性能够提供针对世界其他地方、特别是非洲的HIV-1感染的治疗和预防性效应。此外，使用B亚型Tat的Tat疫苗甚至对于在欧洲和北美提供治疗和预防性效应也具有低的可能性，这是由于免疫系统不能中和细胞外Tat。